细胞融合技术上课.pptVIP

第三节 一.细胞融合技术 概念：两个或两个以上的同种或异种细胞 融合成为一个细胞的过程 1.什么叫细胞融合技术？ 2.常用的人工诱导细胞融合的方法有哪几种？哪一种重复性强，对原生质体伤害小，方法简单，可控性强？ 细胞电融合仪 单：一个杂交瘤细胞 克隆：该细胞增殖分化为相同的细胞群 抗体：该细胞群产生的抗体。 特点：特异性强 灵敏度高 植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较 细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合 实质内容 改变遗传物质、产生新的性状，获得细胞产品(使后代具有双亲的特性) 理论基础 细胞膜的流动性;植物细胞全能性 细胞膜的流动性;细胞增殖 诱导手段 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇 生物法：灭活的病毒 诱导过程 去细胞壁 (纤维素酶、果胶酶) ↓ 原生质体融合 (获得杂种原生质体) ↓ 植物细胞培养 (获得植株) 获得分离的单个动物细胞 (胰蛋白酶处理) ↓ 诱导融合 ↓ 动物细胞培养 (细胞产品) 应用 获得白菜-甘蓝等杂种植物 主要用于单克隆抗体的制备 (杂交瘤细胞) 1.下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 5、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 50 B 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 A 体外培养 注射到 小鼠腹腔 C 体外培养 不能，未对小鼠免疫处理 2.人CD20单克隆抗体是治疗一些恶性肿瘤的特效药物，目前主要是通过培养哺乳动物细胞的方式生产。我国科学家已 培育出世界上第一头转入了CD20抗体基因的转基因牛，可以从它产 的牛奶中直接提取CD20抗体。这项技术成熟后，有望使这一特效药 的生产成本降至现在的1/10。请回答： (1)单克隆抗体的制备过程需先将_____________________和 ______________融合，这一过程的诱导方法与植物体细胞杂交不同的是_________________。 (2)动物细胞培养需要在含__________________混合气体的培养箱中进行，培养液中通常需加入________________等一些天然成分。 (3)转基因技术的核心是______________________。该过程用到的工具酶有 ____________________和_____________。 经过免疫的B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 用灭活的病毒诱导 95%O2加5%CO2 血清、血浆 基因表达载体的构建 限制性核酸内切酶(限制酶) DNA连接酶 3. 野生马铃薯品种的植株具有较强的抗病、抗虫、抗盐碱、抗 寒能力，但块茎不能食用。俄、德、芬兰专家共同做实验研究， 用野生马铃薯与马铃薯的体细胞进行杂交，培育出了生活能力强 的杂交系马铃薯。据图分析回答问题： (1)①过程植物细胞原生质体的分离需经过酶解，其中“酶解”所用的酶应该包括________________。 (2)②过程可用聚乙二醇(PEG)，其目的是______________________。 纤维素酶、果胶酶 诱导原生质体融合 (3)请用文字和箭头表示出④⑤技术过程的实验流程：_____________________________________________。 由此过程可以看出植物细胞有形成完整个体的可能性，这是 __________________的表现。 (4)在培养基上培养一段时间后，原生质体会再生出细胞壁。可以取样，通过__________________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。 (5)请说明运用植物体细胞杂交法的最大好处：_______________________________________________。 融合细胞 愈伤组织 幼苗 植物细胞具有全能性 植物细胞的质壁分离与复原 可以克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍 4．下图为细胞融合的简略过程，请