腺病毒表达系统.pptVIP

病毒表达系统的特点 高转染效率 高蛋白表达水平 对转染效率很低的细胞进行高效转染 (原代细胞等) 稳定,可遗传的表达 (逆转录病毒) 可控制拷贝数 重组腺病毒的作用 在哺乳动物细胞中，AdV已被成功应用于表达各种病毒和细胞的基因，腺病毒表达载体系统表达出蛋白的生物化学特性，可用于商业价值的开发，它可用来生产亚单位疫苗，和新型诊断试剂盒的开发。 AdV可以通过转染细胞来表达蛋白，除基因治疗的相关实验外还可用做体内特性研究。 用AdV转染基因的优点 速度快，简单，不需要任何特殊的装备。 相对其它方法，它非常容易被接受。事实上，这种感染后细胞生存率几乎为100%。因此，AdV有向细胞内转染遗传物质而忽视毒性作用的能力。 许多细胞类型均可被转染。 感染后的数小时，基因表达便可被分析。 刺激后，可有一种以上的基因被同时表达。 重组腺病毒表达系统 通过对本体蛋白的同样的翻译后的修饰，在细胞中表达真核蛋白。 一系列腺病毒转换因素允许产生高水平的异种蛋白。重组蛋白代表了整个细胞蛋白的最丰富的多肽（20%-30%）。 在较好的条件下，表达系统在数升的293细胞悬浮培养液中可以按比例地增加，产量可达90mg/L。 构建重组腺病毒 构建重组腺病毒的传统方法是以同源重组为基础的。 其一用修饰的腺病毒DNA与穿梭载体在HEK 293细胞中进行同源重组； 通过Cre-loxP系统构建重组腺病