实验洋葱根尖有丝分裂标本的制作与观察.docVIP

实验一：洋葱（大蒜）根尖有丝分裂标本的制作与观察 〖实验目的和要求〗 本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法，了解有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有丝分裂各时期的特征。 〖实验原理〗 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主要方式。在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份, 然后分配到子细胞中，因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目，形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。 分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、前期、中期、后期、末期） 〖材料和方法〗 洋葱或大蒜或种子根尖 〖用具和药品〗 水浴锅、显微镜 、恒温箱、剪刀、镊子、单面刀片、载玻片、盖玻片等 卡诺氏固定液、石炭酸品红（或醋酸洋红）染色液、1N盐酸（或0.5%果胶酶+纤维素酶）,秋水仙素（0.1%） 〖实验步骤〗 培养→预处理→切取→固定→解离→染色→压片→镜检 1、取材：用水培养大蒜或洋葱，等根尖长到1-2cm，然后用0.1%秋水仙素预处理1-2h，切取（在分裂高峰期）根尖。 2、固定：卡诺氏固定液12-24小时，然后70%的酒精中4℃冰箱保存。 3、解离：从固定液中取出根尖，用蒸馏水洗3次，每次5min，然后用1N盐酸（或0.5%果胶酶+纤维素酶）60℃解离8-10min，再用蒸馏水洗一次。 4、染色：切取乳白色的分生区组织滴一滴石炭酸品红（或醋酸洋红）染色液，染15min。 5、压片，防止气泡产生。 6、镜检。将制片先放在低倍镜视野下，寻找典型的各时期的分裂相细胞，然后转换于高倍镜下仔细观察染色体的形态并描绘下来。 〖注意事项〗 压片时，防止起泡产生，保证细胞呈现单层。 〖作 业〗 1、绘出所观察到有丝分裂个时期的染色体图，并注明时期。 2、预处理与未预处理的分裂相有何不同为什么？ 3、在高倍镜下观察统计5个视野内的分裂相细胞填入下表：视? 野 间期 前期 中期 后期 末期 合计 1 2 3 4 5 合? 计 占观察总数的％