核基质蛋白SATB1调控乳腺癌Hedgehog信号通路和对乳腺癌干细胞自我更新的影响.pdfVIP

摘要 胞中Hedgehog信号通路的相关基因G1i一1、G1i．2和Ptchl的mRNA表达变化。 结果： l、成功构建并包装针对人乳腺癌MCF一7细胞中SATBl RNAi的慢病毒载 体，根据不同分组在荧光显微镜下绿色荧光显示情况得出当MOI--20并添加 ENi．S的感染效率最佳。采用MOI=20并添加ENi．S代替培养基的培养条件下， 转染MCF一7细胞，筛选出RNAi效果最佳的MCF一7／siSATBl组进行细胞培养(荧 光定量PCR显示SATBlmRNA相对表达量为O．370，抑制率，为63．00％，Mcf-7 组和SATBl／GV 1 15．RNAi#4组数据的2。△必经t检验2组间PO．01， SATBlmRNA表达有差异；Western—blot显示蛋白相对表达量为O．522，抑制率达 47．78％，MCF．7组和SATBl／GV 115-RNAi#4组目的蛋白与内参比值经t检验2 组间P0．01，SATBl蛋白表达有差异)。 2、CCK一8法检测MCF一7、MCF．7／siControl和MCF．7／siSATBl细胞增殖活 力结果显示3组细胞孔吸光度均值分别为：@MCF．7：1．749+0．104； @MCF．7／siControl：1．699+0．086：@MCF一7／siSATB 1：1．1 54+0．075，MCF 一7／siSATBl细胞的增殖活力是MC