宝生物双酶切使用表.docVIP

Double Digestion 双酶切反应 时Universal Buffer 通用缓冲液 的使用表 ■ 说明 使用二种酶同时进行DNA切断反应 Double Digestion 时，为了节省反应时间，通常希望在同一反应体系内进行。TaKaRa采用Universal Buffer表示系统，并对每种酶表示了在各Universal Buffer中的相对活性。尽管如此，在进行Double Digestion时，有时还会难以找到合适的Universal Buffer。本表以在pUC系列载体的多克隆位点处的各限制酶为核心，显示了在Double Digestion可使用的最佳Universal Buffer条件。在本表中，各Universal Buffer之前表示的 [数字×] 是指各Universal Buffer的反应体系中的最终浓度。TaKaRa销售产品中添附的Universal Buffer全为10倍浓度的缓冲液。终浓度为0.5×时反应体系中的缓冲液则稀释至20倍，1×时稀释至10倍，2×时稀释至5倍进行使用。 ■ 注意 1 μg DNA中添加10 U的限制酶，在50 μl的反应体系中，37下反应1小时可以完全降解DNA。 为防止Star活性的产生，请将反应体系中的甘油含量，尽量控制在10%以下。 根据DNA的种类，各DNA的立体结构的差别，或当限制酶识别位点邻接时，