离心.pptxVIP

  • 21
  • 0
  • 约 31页
  • 2016-08-22 发布于河南
  • 举报
离心

离心技术 离心原理 颗粒的质量、密度、大小及形状等彼此各不相同,在同一固定大小的离心场中沉降速度也就不相同,由此便可以得到相互间的分离。 离心力 溶液中的固相颗粒做圆周运动时产生一个向外离心力,其定义为: F = ma=mω2r 其中:F 为离心力的强度; m 为沉降颗粒的有效质量; ω 为离心转子转动的角速度,其单位为radian/s;r 为离心半径(cm),即转子中心轴到沉降颗粒之间的距离。 相对离心力(RCF) 在离心场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数。 ∴ RCF = 1.119×10-5×(rpm)2r rpm---revolutions per minute为每分钟转数, r/min 低速离心时常以转速“rpm”来表示 高速离心时则以“g”表示 Svedberg The Svedberg The Nobel Prize in Chemistry 1926 1924年,T.Svedberg制成了第一台5000×g(5000 r/min~8000 r/min)相对离心力的超离心机,奠基了“超离心技术”,开创了生化物质离心分离的先河,并准确测定了血红蛋白等复杂蛋白质的分子量,获得了1926年的诺贝尔化学奖 沉降系数 (sedimentation coefficient,s) 在沉降速度中, m 、f 很难精确测定。因此,常用沉降系数(sedimentation coefficient)去描述一些结构和分子量都暂不清楚的大分子化合物的大小。 沉降系数定义为沉降速度与离心力的比率,即: S = ?/ [?2r ] 沉降系数的单位为s(秒),1 S=10- 31 s 特定的蛋白质有特定的沉降系数,故可根据沉降系数来分离和鉴定蛋白质。蛋白质和其他生物大分子的沉降系数介于1~200S之间。 一般来说分子量大的S也大,分子量小的S也小,但分子量与沉降系数不成正比,因为沉降系数还受到蛋白质分子形状等因素的影响。 表:几种蛋白质的分子量和沉降系数  蛋 白 质 分子量 沉降系数(S) 细胞色素C(牛心) 13 370 1.17 肌红蛋白(马心) 16 900 2.04 糜蛋白酶原(牛胰) 23 240 2.54 β-乳球蛋白(羊奶) 37 100 2.90 血红蛋白(人) 64 500 4.50 血清白蛋白(人) 68 500 4.60 过氧化氢酶(马肝) 247 400 11.30 脲酶(刀豆) 482 700 18.60 纤维蛋白原 339 700 7.60 沉降速度 固体在沉降过程中,会遇到摩擦阻力Ff Ff =f ? f =摩擦系数(取决于固体颗粒的大小和形状以及液相介质的密度和粘度。 ?=沉降速度 当离心力等于摩擦阻力时,固体颗粒以恒定速度沉降,此时 F = Ff m?2r = f ? ? =[m ?2r]/ f 离心机的主要构造和类型 工业用离心机 离心机 制备性离心机 实验用离心机 分析性离心机 制备性离心机可分为三类 1.普通离心机:最大转速6000rpm左右 2.高速冷冻离心机:最大转速为20000~ 25000rpm(r/min) 3.超速离心机:转速可达50000~80000rpm, 装有真空系统,这是它与高速离心机的主 要区别。 转头 水平转头 角式转头 荡平式转头 垂直转头 离心管 塑料离心管常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中PP管性能较好。塑料离心管的优点是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。 不锈钢管强度大,不变形,能抗热,抗冻,抗化学腐蚀。但用时也应避免接触强腐蚀性的化学药品,如强酸、强碱等。 控温系统 实验室离心机有低温控制和常温2种,但超过18000r/min的机型多为低温控制。低温控制多为一级压缩机无氟制冷,控温范围一般在-9~-40℃或-20~-40℃,精度≤1℃。具有预冷程序、待机状态可恒冷维持功能,以适应实验室机动性、连续性工作需要。 安全保护 具备自保护措施对离心机安全操作非常重要,如:自动锁盖、超温、过速、失平衡保护等,一旦发生误操作将发出提示声音报警。 离心操作的注意事项 使用各种离心机时,必须事先在天平上精确平衡离心管和其内容物,转头

文档评论(0)

1亿VIP精品文档

相关文档