吸入低浓度一氧化碳对大鼠肾缺血再灌注损伤作用.pdf

目 录 中文摘要??????????????????????????1 英文摘要????????m O O O O O O OI O O O O Q O?????????????3 研究论文 吸入低浓度一氧化碳对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用 前言“···????“?一··””“”“““????一···??”一”一一“”·6日!J吾““”?? ?”?一” ?”“““? ””””” ””““ 一 材料与方法???????O O O O O O O O g?????????????6 结果···????···········“·?·······?·?··?0 0 0 o o 0 o 0 o o o 0 B 0 0 0 0 0?”?·9 附图·················?···???·······························?············11 附表??????????????????????????19 ．讨{仑······················?·?········?·····················??···········20 结论······??·???·················?·????········?············22 参考文献????????????????????????24 综j丕?????···?????????···???????··?????27 致谢············?··?························????········??···?··??37 个人简历??????????????????????????38 中文摘要 吸入低浓度一氧化碳对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用 摘 要 肾缺血再灌注(IR)损伤主要发生于创伤应激、失血性休克、肾脏手术 及肾移植患者的转归过程中。防治肾IR损伤是救治此类患者的一个关键环 节。研究表明，IR损伤是一种缺血后炎性损伤，主要由缺血区细胞产生释 放的活性氧物质及炎症介质介导引发。在对气体信使分子一氧化碳(co) 的研究中发现，CO具有抗炎、抗氧化损伤的重要功效。本课题组先前的 研究证实，给予适量外源性CO，对肢体IR引发的肾等远隔器官损伤具有 显著的对抗作用。另有报道，给予外源性CO(体积分数为0．05％)对移植肾 有保护作用。以上研究结果显示，CO对直接及间接肾IR损伤均有防治效 应，进一步系统探讨CO对肾脏IR损伤的作用及其规律，可为上述患者的 救治提供新的应对策略。 目的：本实验拟通过夹闭及再开放肾动脉的方法复制肾IR损伤模型， 使模型动物吸入不同浓度(体积分数在安全范围内)的CO后，观测肾功能 及病理学指标的变化，以探讨不同浓度的CO对肾IR损伤的效应。 方法：(1)动物分组：健康清洁级SD大鼠30只，雌雄不拘，体重 250．3009，随机分为：假手术(S)组，6只；IR组，6只；IR吸入CO(RC)组， 1 8只，分为RCo．025、RCo．05及RCo．075三个浓度组，每组吸入CO的体积分数 分别为0．025％、0．05％、0．075％。(2)模型复制：在麻醉状态下，暴露并游 离双侧肾蒂，用无创血管夹将其夹闭，45 min后，去掉血管夹实施再灌注， 以此制得大鼠肾IR模型。S组模拟手术过程，但不造成肾缺血。(3)吸入CO 的方法：RC组动物吸入CO，把动物置于特制的器皿中，通入含有CO的 医用空气，CO的体积分数分别为0．025％、0．05％、0．075％。于术前1 h和 术后6h持续吸入CO。S、IR组暴露于空气中，自由呼吸。(4)取材观测：IR、 RCo．025、RCo．05及RCo．075组于再灌注到6 h时，S组于对应的时间点，在深 度麻醉下，经右心房采血各5 ml，静置，离心，取上清液送全自动生化 分析仪检测血钾(K+)、肌酐(CRE)、尿素氮(BUN)等肾功能指标，开腹取 肾分别做以下观测：对肾的色泽、质地及渗出情况进行大体观察、照相； 取右侧肾脏进行湿干重比值测定，用电子分析天平测量湿重，在600C电热 中文摘要 恒温培养箱中干燥7天，待水分完全析出后测其干重，算得湿干重比值； 取左肾石蜡包埋切片、HE染色，行组织病理学观察。 结果：(1)大体观察：S组，肾的颜色暗红，弹性好，无出血及渗出物； IR组，肾色泽深暗，呈褐色，明显肿胀，弹性差，肾皮质内有片状出血 点；RC组，肾的颜色介于S与IR组之间，触之弹性较IR组好，皮质内 出血点较IR组明显减少。(2)湿干重比值：IR组RCo．025组RCo．05组RCo．075 组S组。IR组和其余各组相比，有统计学差异俨o．05)；S组和其余各组 相比，有统计学差异(氏0．05)；RCo．05和RCo．07