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微生物之生長曲線-2
微生物之生長曲線 1 微生物生長模式 1.1 生殖(Reproduction) 微生物在適當環境下攝取足夠養分，使細胞長大，也會進行繁殖，因此 生長 包含: 1. 個別細胞之生長與繁殖 2. 微生物族群之增加 微生物生殖分為: 1. 有性生殖(sexual reproduction): 雌、雄細胞發生融合及交換遺傳物質 2. 無性生殖 (asexual reproduction): 出芽生殖(budding) 、二分裂生殖法(binary fission) 、分支生殖法(branching) 、絲狀生殖 法(mycelial growth) 或尖端生長(apical growth) 1.2 微生物生長之測定方法 一、細胞數量之測法 1. 抹片顯微鏡計數法 2. 特殊玻片顯微鏡計數法:血球計數器 3. 平板測定法:培養皿，菌落30-300個 4. 薄膜過濾計數法: 0.45μm濾膜，菌落 200個 二、細胞重量之測法 1. 細胞乾重法 2. 濁度法 3.氮含量測定法 三、菌體活性測定 ATP、脫氫酵素活性、氧氣攝取率 1.3 微生物之生長曲線 一、以菌數和時間作圖 在批次培養情形下，可以菌數和時間作圖，得生長曲線。 實驗以批次培養方式進行 遲滯期(lag phase): 微生物正適應新環境，吸收養份以合成新細胞，細胞雖變大，但仍未分裂，故細胞數目無明顯增加。 對數期(logarithmic phase): 細胞呈幾何級數增加，菌之生理較一致，為微生物實驗最佳時期。 穩定期(stationary phase): 微生物代謝，消耗養分、同時產生代謝毒物，造成新分裂與死亡之菌數約略相等，因此菌數沒太大改變。 死滅期(death phase): 養分已漸消耗完畢，而代謝毒物累積更多，造成新生菌數遠小於死亡菌數，因此菌數遞減。 二、以比生長速率和時間作圖 比生長速率 μ = 步驟說明: 取0.1g之酵母菌加入100mL培養液； 取菌液加入比色管，測其吸光值，此時為0時之吸光值；同時將部份菌液做連續稀釋，選一濃度之菌液做塗碟或倒碟，次日計算其菌數； 加入2g葡萄糖(glucose)至菌液中，經15-20分後，再取菌液測其吸光值， 如此重覆至少6次。每次皆用部份菌液做菌數計算，如上所述。 完成後以吸光值跟時間作圖，吸光值及總菌數作圖(並求其直線方程氏)及總菌數跟時間作圖； 討論各圖之意義。 如已作過直接計數法之組，應以當時所得直線方程式結果，將此次之吸光值，代入，求菌數，比較兩者之結果。 * * *
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