玉米淀粉的液化与糖化.ppt

一、实验目的 1、掌握用酶法水解淀粉制备水解糖的原理及方法。 2、掌握还原糖的化学测定和比色测定方法。 二、实验仪器、设备和材料 1、设备 25升罐（可用本院25升发酵罐代替）；装料按20升计，采用小型板框过滤机压滤，烘箱；水桶，量筒。 2、分析仪器 分光光度计，水浴锅，糖度计，滴定管，电炉，白瓷板，三角瓶，阿贝折光仪，比重瓶，pH计。 3、实验主要原料：玉米淀粉，高温液化酶和糖化酶。 三、实验原理、过程和方法 1、主要过程：通过双酶法制糖，从玉米淀粉原料出发，经配料，糊化，液化和糖化，过滤，制备成淀粉水解糖。本实验所得到的糖液，可用于下一批酵母发酵实验。 2、配料：称重，按照20升有效体积，配制30%淀粉乳。取样烘干至恒重，测定淀粉中的水分含量。 3、糊化和液化 糊化原理：将淀粉乳加热，淀粉颗粒膨胀，由于颗粒的膨胀，晶体结构消失，变成糊状液体，淀粉不再沉淀，这种现象称为糊化。不同的淀粉的糊化温度不同。如玉米淀粉开始糊化的温度为62.0℃,中点温度为67℃，终结温度为72℃。糊化分为：预糊化（吸水），糊化（体积膨胀）。糊化过程中，要防止淀粉的老化（分子间氢键已断裂的糊化淀粉又重新排列形成新的氢键的过程）。 液化原理：液化是利用液化酶使糊化淀粉水解到一定的糊精和低聚糖程度，粘度大大降低，流动性增加。 液化方法分：酸法、酶酸法、酶法等。以生产工艺不同又分为间歇法，半连续和连续式；液化设备有：管式、罐式、喷射式。加酶方法有：一次加酶、二次加酶、三次加酶。根据酶制剂的耐温性分为中温酶法、高温酶法、或中温酶和高温酶混合法。本实验采用：高温酶法，间歇式，罐式，二次加酶法。 间歇液化法工艺流程： 配制30%的淀粉乳，PH值6.5，加入氯化钙（对固形物0.2%），加入液化酶(加酶量根据酶制剂厂商的要求)，在剧烈搅拌下，先加热至72℃，保温15min，再加热至90℃，并维持30min，以达到所需的液化程度（DE值：15—18%）。碘反应呈棕红色：最好在液化后，再升温至120℃，保持5—8 min，以凝聚蛋白质，改进过滤。 4、糖化工艺相关数据分析 糖化的理论收率：因为在糖化过程中，水参与反应，故糖化的理论收率为111.1%。 (C6H10O5)n+nH2O=nC6H12O6 淀粉 水 葡萄糖 162 18 180 实际收率= 淀粉转化率：指100份淀粉中有多少份淀粉被转化为葡萄糖。 淀粉转化率的计算： 转化率= [糖液体积(V)×糖液葡萄糖浓度%(C)] ×100% [投入淀粉量(W)×淀粉含量(C)]×1.11 DE值：用DE值表示淀粉水解的程度或糖化程度。糖化液中还原性糖以葡萄糖计，占干物质的百分比称为DE值。 DE值计算： DE=还原糖浓度(C2)×100% 干物质浓度(W1)×糖液比重d) 还原糖用裴林氏法等法测定，浓度表示：葡萄糖g/100ml糖液； 干物质用阿贝折光仪测定，浓度表示：干物质g/100ml糖液。 糖化工艺流程： 液化结束后，迅速将料液用酸将pH调至4.2-4.5，同时迅速降温至60℃，加入糖化酶，60℃保温数小时后，当用无水酒精检验无糊精存在时，将料液pH调至4.8—5.0，同时，将料液加热至80℃，保温20min，然后将料液温度降至，开始过滤。 5、过滤 在发酵罐内将料液冷却至60—70℃；洗净板框过滤机，装好滤布；接好板框滤机的管道；泵料过滤；热水洗涤（60—70℃）；空气吹干；过滤结束后，洗净过滤机及有关设备。量取糖液体积；取样分析还原糖浓度。 四、实验分析项目和方法 分析试剂： 测定液化反应终点（碘反应）； 总糖（裴林法）； 还原糖（水杨酸比色法）的测定方法； 原料淀粉含量的测定，原料含水量的测定（烘干称重法）； 糖液透光率（分光光度计法）； 糖化终点测定（无水乙醇检验）； 糊化液和糖化液DE值； 用分光分度计对料液透光度的测定方法。 五、数据处理 在详细记录实验数据的基础上完成实验报告。 计算转化率： 各组配合实验，不同加酶量条件下还原糖浓度动力学曲线。 六、实验结果和讨论 糖化酶用量及糖化时间对糖化效果的影响； 液化和糖化温度及pH对实验效果的影响；