无菌工艺和无菌检验.ppt

过滤除菌工艺 无菌分装工艺 如：冻干粉针、粉针、无菌原料药、生物 疫苗、血液制品等产品生产。 无菌生产工艺： 对进入无菌区的物料充分灭菌，消除污染源。 所有接触经除菌过滤的药液的设备都经过清洁和灭菌验证 避免人员直接接触除菌后的药液、容器 防止人员活动干扰层流 目的：以防止污染为目的，消除生产工艺中潜 在污染的各种可能性。 无菌生产工艺的质量保证： 项目 终端灭菌工艺 无菌生产工艺 SAL 10-6 10-3 关键区环 境洁净度 大输液：灌封为万级环境 下的局部百级 小水针：灌封万级 灌封为万级环境下的局部百 级 中控指标 生物负荷、耐热性灭菌 釜中的温度控制 生物负荷（设置警戒线）灌封 区不得检出污染菌，过滤前后 滤膜的完整性检查 人 员 要求严格 更严格（操作方式、走动缓慢、 身体表面微生物的检测……） 终端灭菌工艺 VS 无菌生产工艺 无菌工艺模拟或 培养基灌装验证 无菌生产工艺工艺验证要点： Process Simulation Testing for Aseptically Filled Products无菌灌装产品的工艺模拟试验 解读：PDA Technical Report N0.22 评价无菌工艺操作能力最有效的方法。 完全模拟工艺配制和灌装工艺，用一种可以促进微生物生长的培养基替代无菌产品。 确认无菌生产工艺的无菌保证水平（SAL） 的方法。 工艺模拟实验（培养基灌装） 证明采用无菌工艺生产无菌产品的能力 无菌工艺人员的资质和保证 符合现行GMP要求 无菌工艺模拟的目的： 安装 干扰 容器尺寸 容器的密封 灌装速度 灌装体积 灌装持续时间 生产批量、工艺模拟批量 工艺模拟实验原理1 手动灌装 培养条件 培养基的选择 容器检查 惰性气体 设施考虑 人员考虑 工艺模拟实验原理2 工艺 人员 设备 环境 培养基灌装验证包含： 模拟工艺的定义:使用促微生物生长的培养基，及与无菌物料生产相似的方法评估无菌工艺的方法。 包括工艺的所有步骤，从药物成分、赋形剂（如果有）、容器、密封的灭菌到产品的密封。在无菌灌装之前无菌药物容器和密封后放置的最长时间必须包括在模拟范围内。 工艺 非无菌物料进入无菌区域的“切入点”。 未经灭菌或消毒的物料，灭菌后进入灌装间的保护 手工操作进入灌装间前的防护。 设备： 生产环境始终符合无菌产品生产的要求 保证系统和设备按照设定的目的正常运转 无菌保证 — 环境监测 取样点的选择 取样频率 行动限和警戒线 方法学和数据解释 GMP附录1：无菌药品 第十条（二）： A级区监测的频率及取样量，应能及时发现所有人为干预、 偶发事件及任何系统的损坏。 环境监测： 最长的无菌生产、操作时间 无菌生产中每次发生的干预事件 冷冻干燥 设备的无菌组装 人员数目和活动 无菌条件的转移 交接班变化、中断和衣物更换 模拟的无菌工艺应该包含（1）：（FDA的建议） 无菌设备连接和断开 无菌样品的收集 生产线速度和配置 重量检查 设备、容器密闭检查 SOP的特殊规定 模拟的无菌工艺应该包含（2）：（FDA的建议） 灭菌系统 洁净环境系统 公用辅助系统 生产控制系统 设备清洗 模拟工艺还涉及： （一）选择标准： 促生长能力、 低选择性、澄明度、中 等浓度和过滤性。 培养基： 促生长能力 支持少量微生物的复壮和生长，10-100CFU或更少。 低选择性 1、适应广谱微生物的生长，细菌、霉菌和酵母菌都可以生长。 2、企业自己的菌种库（环境中分离的微生物） 培养基： 澄明 清澈，如果发生浑浊，能够观察到 中等浓度 遵循供应商的建议。其他浓度或经过验证 过滤性 培养基应当能够穿过生产过程所使用的同样级别的过滤器 培养基 （二）培养基灵敏度检查： 1、将无菌培养基分装到一定数量的无菌试管。 2、制备好的菌悬液（枯草杆菌、白色念珠菌） 10-100cfu/mL。 3、加入上述菌悬液1mL进准备好的培养基内，每 份培养基至少加2管。 4、培养7天。 5、每种培养基50%发生浑浊，长菌。 培养基： 1、培养基储罐灭菌，移入无菌区域。 2、灭菌后的连接件、阀门、过滤器等和培养 基储罐无菌连接。 3、灭菌后的培养基经过滤器和储罐无菌连接。 4、储罐另一端和灌装机相连，连接时无菌的。 〈USP〉 培养基的制备： 1、培养基的无菌检验 灭菌后，灌装前的培养