白细胞计数实验.pptVIP

目 的 掌握显微镜法白细胞计数的原理及方法 * * 白细胞计数 （ white blood cell count ，WBC ） 原 理 用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，将稀释液充入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算求出每升血液中的白细胞数量。 器材：一次性微量吸管、乳胶吸头、试管、棉球、2ml移液管，显微镜、改良Neubauer计数板 试剂：白细胞稀释液 ：2%冰乙酸溶液中加入10g/L结晶紫（或亚甲蓝）3滴。 标本：末梢血或静脉血 操 作 加稀释液：吸取白细胞稀释液0.38ml于试管中。 吸取血液： 用微量吸管吸取末梢血（或抗凝静脉血） 20ul ，擦去管外余血。将吸管插入含白细胞稀释液试管的底部，轻轻放血，并吸取上层稀释液洗管 2～3次 。 混匀： 将试管中血液与稀释液充分混匀，直至变成深棕色。 准备计数板：用拭净血细胞计数板和盖玻片，采用推压法从计数板下缘向前平推盖玻片，将其盖在计数池上。 充池：再次混匀，用吸管将稀释液滴入计数板和盖玻片交界处，利用虹吸作用液体顺其间隙充满计数池，室温静置2～3 min，待WBC完全下沉。 计数： 在低倍镜下计数四角4个大方格内的WBC总数。 计算： 白细胞 = N/4×10 ×20 ×106/L = N/20 ×109/L 注意事项 因第l滴血混有组织液，应擦去。不能过度挤压，以免组织液混入引起血液凝固或造成计数结果不准确。 保证计数板和盖玻片清洁。 如充池过少、过多或有气泡，拭净计数板及盖玻片后重新操作。 计数池内如细胞分布严重不均，应重新充池。数RBC用高倍镜，计数WBC用低倍镜。 计数大方格内的压线细胞，遵循数上不数下、数左不数右的原则。 WBC过多时，可加大稀释倍数的方法; WBC过少时，可扩大计数区域，计数8个或9个大方格；也可采用减少稀释倍数的方法。 白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，因此有核红细胞可使白细胞计数结果偏高。