月季课时一.ppt

* 植物的花药培养在育种上有什么意义？ 花粉粒（1N） 单倍体植株（1N） 二倍体纯合子植株（2N） 缩短了育种周期，为新品种的培育开辟了新途径。 花的结构 二、 基础知识 （一）被子植物的花粉发育 花粉： 花丝 花药 雄蕊 囊状结构，内有很多花粉粒 雄蕊 花粉是由花粉母细胞（即小孢子母细胞）经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期等阶段。 （一）被子植物的花粉发育 （一）被子植物的花粉发育 小孢子母细胞花粉母细胞 小孢子 减数分裂 有丝分裂 花粉管细胞核 生殖细胞核 有分丝裂 精子 1个 营养细胞 生殖细胞 4个 4个 4个 4个 4个 8个 （小孢子四分体时期 单核居中期 单核靠边期 双核期） （二）产生花粉植株的两种途径 花粉 花粉 胚状体 愈伤组织 丛芽 生根 移栽 脱分化 分化 再分化 诱导 脱分化 说明：两种途径之间并没有绝对的界限，主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 ①不选择单核期之前花药原因：花药质地幼嫩，容易破碎； ②不选择单核期之后花药原因：花瓣开始松动，给材料消毒带来困难困难； ③挑选单核期花药方法：应当选择完全未开放的花蕾，菌少，易消毒。 （三）影响花药培养的因素 1、材料的选择： ⑴不同种类植物的诱导成功率不同。 ⑵同一种植物，亲本植株的生理状况对诱导成功率有直接影响。 ⑶合适的花粉发育时期：初花期时的花药最佳。 ⑷选择最合适的花粉发育时期 花药培养所采用的培养基各成分中植物生长调节剂的水平和配比起决定作用。 ⑴诱导愈伤组织或胚状体产生的培养基：广泛使用 2，4-D、IAA； ⑵诱导分化的培养基常除去2，4-D而以IBA代之。 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种密度、培养的环境条件等对诱导的成功率都有一定的影响。 2、培养基的组成： 3、其他因素： 花瓣松动后，微生物就可能侵入到花药，给材料的消毒带来困难。 为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难？ 1. 选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 2. 最常用的方法： 某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青—铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 三、 实验操作 （一） 材料的选取 醋酸洋红法、焙花青—铬矾法。 花蕾 无菌水清洗 吸干表面水分 0.1％的氯化汞溶液 2-4 min 无菌水清洗3-5次 70％的酒精浸泡30s 1.将花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30s 2.无菌水清洗 3.无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4.放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2~4min（也可用质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液） 5.无菌水冲洗3~5次 （二）材料的消毒 消毒后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。 在剥离花药时，要尽量不损伤花药（否则接种后，容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织），同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 （三）接种和培养 经过20-30天培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便进一步分化出再生植株。 每瓶接种花药7-10个，温度控制在25℃左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 如果花药开裂释放出胚状体，则一个花药内就会产生大量幼小植株，必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开，分别移植到新的培养基上，否则这些植株将很难分开。 对培养出来的植株做进一步的鉴定和筛选。因为在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常常会出现染色体倍性的变化。 【例1】如图是被子植物花粉发育过程的简略 表示，请据图回答： 　　　小孢子母细胞→①→②→③→双核期 （1）①是指_________时期，由小孢子母细胞经_________分裂形成。 （2）②和③分别是指________期和________期 （3）1个花粉母细胞经过分裂最多能形成_______个花粉粒，________个细胞核。 （4）双核期的两个核分别叫________核和________核。 （5）在进行花药组织培养时选择_____段的培养成功率最高。 答案：（1）四分体　　减数 （2）单核居中　　单核靠边　　含浓厚的原生质 （3）4　　12 （4）生殖细胞　　花粉管细胞 （5）②→③ *