果蝇杂交试验模板.doc

果 蝇 杂 交 实 验 实验人：  实验时间： 9月11日至11月6日 实验地点： 前言 通过实验验证分离定律、自由组合定律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。 果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的好材料，尤其在基因分离、连锁、交换等方面，对果蝇的研究更是广泛而充分。本次通过实施已有实验方案，观察后代中果蝇的各种性状，结合各种统计处理方法，从而证明这三大定律。 分离定律是指在生物的体细胞中，控制同一性状的一对等位基因在杂合状态中保持相对的独立性，在配子形成时，按原样分离到不同的配子中去，理论上配子分离比是1∶1，F2代基因型分离比是1∶2∶1，若显性完全，F2代表型分离比是3∶1?。? 自由组合定律是指非同源染色体上的决定不同对性状的基因在形成配子时等位基因分离，不同对基因（非等位基因）之间互不干扰，其实质是F1产生配子时，等位基因分离，非同源染色体上的非等位基因自由组合。最初由孟德尔在做两对相对性状（豌豆的子叶颜色黄色，绿色，圆粒和绉粒）的杂交实验时发现，基因分离比为9:3:3:1。独立组合位于不同染色体上的2个等位基因是独立传给子代的。因此可在验证自由组合定律的同时，选取其中一组性状来验证分离定律。用于杂交的2对等位基因必须位于不同染色体上，即不能连锁。 伴性遗传是指性染色体上的基因所控制的性状的遗传方式。又称性连锁（遗传）或性环连。此病分为X伴性遗传病和Y伴性遗传病两大类。常染色体上的基因遗传时，性状分离在雌雄两性中有同样的表现。性染色体上的一对等位基因伴随性染色体遗传，其性状遗传与性别相联系。 对于此次实验，果蝇为XY型性别决定，但与一般XY型性别决定所不同的是，果蝇的性别由X染色体的数目决定，含有2条及以上X染色体的果蝇为雌性。伴性遗传是指生物某些性状的遗传常与性别联系在一起的现象，出现这种现象是由于支配某些性状的基因位于性染色体上。 控制体色性状的突变基因位于2号常染色体，灰体对黑体完全显性，控制眼色性状的突变基因位于性染色体。红眼对白眼完全显性，用黑体红眼果蝇(♀)与灰体白眼果蝇(♂)交配，得到F1代都是灰体，F1代雌雄个体之间相互交配，F2代产生性状分离，出现四种表现型。? 果蝇的性染色体有X和Y两种，雌蝇为XX，雄蝇为XY。红眼与白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因(W)位于X染色体上，且红眼(W)对白眼(w)为完全显性。当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，F1代雌性果蝇、雄性果蝇都为红眼，F2代雌性果蝇都是红眼，雄性果蝇红眼和白眼的比例为1∶1；当白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交时，F1代雌性果蝇为红眼，而雄性果蝇为白眼，此现象又称为绞花式遗传，F2代雌性果蝇的红眼与白眼比例为1∶1，雄性果蝇的红眼与白眼比例也是1∶1?。 实验材料及方法 1.1 实验材料 e＃品系（黑檀体、红眼、长翅 1.4 实验流程 1.4.1 果蝇的麻醉 ?? 将果蝇转至麻醉瓶中，滴数滴乙醚滴在麻醉瓶的棉塞上，塞紧瓶塞，略等1-2min，果蝇开始变得不活动，由瓶底跌落在瓶底，呈昏迷状态（附肢收缩，双翅紧贴背部）。若在观察中果蝇苏醒了，需要再麻醉时，可滴几滴乙醚入再麻醉皿的滤纸上，立即扣住复苏的果蝇，数秒钟后继续观察。当看到果蝇不动时，即可倒在白瓷板上观察性状与雌雄区别。 若其翅膀外展45度角时说明果蝇已死亡，因此要把握好麻醉时间，以自然停飞状态较好。 处女蝇的收集 果蝇雌性生殖器光具有受精囊，可保留交配所得的大量精子，能使大量的卵受精，因此作品系间杂交时，必须选用处女蝇，而雌蝇刚羽化后一般12h之后交配，因此在把培养瓶内的果蝇除去后，8h内所收集到的雌蝇必定为处女蝇。 当需要从亲本取出所需的果蝇材料时，转移至25℃温箱培养，并且当亲本培养瓶中出现第一个蛹后，除去所有成虫或转瓶培养，每隔9h观察一次，此时出现的果蝇进行性别判断，分离出来的雌蝇必然为处女蝇。 果蝇杂交流程（e#♀╳6#♂和e#♂╳6#♀） 杂交前步骤 首先每一培养瓶要贴好标签，注明品系、杂交情况、时间、班别及姓名。 分别取黑腹果蝇原种e#和6#于两个培养瓶中，并培养7～8d，当培养瓶出现第一个蛹后，分别将果蝇原种除去。 然后e#培养瓶每隔9h取一次处女蝇，超过9h的雌蝇除去不用，可保留雄蝇，将取出处女雌和雄性果蝇分别放置于两个培养瓶中，直到有6—7对处女蝇和6—7对雄性果蝇。 同样地6#培养瓶的取处女蝇和雄性果蝇操作与e#果蝇的取法一致。 杂交步骤 杂交前确认两个品系的