中学生物实验教学37.pptVIP

四川师范大学生命科学学院 张小勇 生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇 综合实验3 【实验3-7】 观察DNA和RNA在细胞中的分布 【目的原理】 染色剂 染色颜色 主要存在部位 DNA RNA 吡罗红 甲基绿 红色 绿色 主要在细胞核，线粒体、叶绿体含少量 主要在细胞质 【实验准备】 人的口腔上皮细胞 大烧杯，小烧杯，温度计，滴管，消毒牙签，载玻片，盖玻片，铁架台，石棉网，火柴，酒精灯，吸水纸，显微镜 质量分数为0.9%的NaCl溶液，质量分数为8%的盐酸，吡罗红甲基绿染色剂，蒸馏水 【安全事项】 ① 用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂 ② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟 【实验方法步骤】 取口腔上皮细胞制片 水解 冲洗涂片 染色 观察 （8%HCl，能改变细胞膜的通透性，同时使DNA与蛋白质分离） （蒸馏水） （0.9%的NaCl） 【方法步骤】 (一)取口腔上皮细胞制片 1、在洁净的载玻片上，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液（维持口腔上皮细胞的正常形态）。 2、 用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。 3、点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。 (二)水解 1、在小烧杯中加入30mL质量分数为8%的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。 2、在大烧杯中加入30℃温水。 3、将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。 【方法步骤】 1、用低倍显微镜观察：选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，将物象调节清晰。 2、换用高倍显微镜观察，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。 (四)染色 1、用吸水纸吸去载玻片上的水分。 2、将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴在载玻片上，染色5min。 3、吸去多余染色剂，盖上盖玻片。 (三)冲洗涂片 (五)观察 【方法步骤】 真核细胞的DNA主要分布于细胞核中。 线粒体、叶绿体内也含有少量的DNA。 RNA主要分布在细胞质中。 五、实验结论 【注意事项】 1.材料的选择 ① 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察； ② 常用的观察材料有人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰，不可使用紫色表皮细胞) 2.取材要点 ① 取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质； ② 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞 3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。 四川师范大学生命科学学院 张小勇 生物教学论实验 四川师范大学生命科学学院 张小勇