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第34讲　基因工程 演练真题　领悟考向 1. 2013·江苏卷 下列关于转基因生物安全性的叙述中，错误的是 A.我国已经对转基因食品和转基因农产品强制实施了产品标识制度 B.国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能的危害 C.开展风险评估、预警跟踪和风险管理是保障转基因生物安全的前提 D.目前对转基因生物安全性的争论主要集中在食用安全性和环境安全性上 解析　我国农业部颁布了《农业转基因生物标识管理办法》，要求对转基因生物产品及其加工品加贴标注，以方便消费者自主选择。但国际上并非大多数国家在转基因食品标签上警示性注明可能的危害，A项正确、B项错误；目前对转基因生物安全性的争论主要集中在转基因食物的安全性和转基因生物对环境安全的影响上，但这些通过风险评估、预警跟踪和风险管理等是可以解决的，C、D项正确。 答案　B 2. 多选 2014·江苏高考 下列关于基因工程技术的叙述，错误的是 A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列 B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应 C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达 解析　不同的限制酶识别的核苷酸序列的数目不同，A错误；PCR中温度的周期性改变是不同反应步骤需要不同的温度，如高温解旋，低温复性，中温延伸，B错误；载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因，C错误；外源基因导入受体细胞染色体上后未必能正常表达，D正确。 答案　ABC 3. 多选 2013·江苏单科，22 小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因 目的基因 后再重组表达。下列相关叙述正确的是 A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列 B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列 C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶 D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞 解析　利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列设计引物，但不需知道目的基因的全部序列，需要考虑载体的序列；因PCR反应在高温条件下进行，故反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶；因某些目的基因编码的产物需经特殊的加工修饰过程，故一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞。 答案　BD 4. 2010·江苏卷，2 下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题。 1 一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有________个游离的磷酸基团。 2 若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越________。 3 用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是________________________________________________________________________。 4 与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止__________________________________________________。 5 为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入________酶。 6 重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了________。 7 为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在________的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 答案　 1 0、2　 2 高　 3 SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因　 4 质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化　 5 DNA连接　 6 鉴别和筛选含有目的基因的细胞　 7 蔗糖为唯一含碳营养物质 5. 2015·江苏单科，32 胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该方法所用的基因表达载体，图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程 融合蛋白A、B分别表示β－半乳糖苷酶与胰岛素A、B链融合的蛋白 。请回答下列问题： 图1 图2 1 图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是________。 2 图1中启动子是________酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达；氨苄青霉素抗性基因的作用是___________________________________________。 3 构建基因表达载体时必需的工具酶有_________________________________。