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了哥王中芫花素含量的高效液相色谱法测定
了哥王中芫花素含量的高效液相色谱法测定
Abstract:ObjectiveTo establish a method for the determination of the content of genkwanin in Wikstroemia indica(L.)C.A.Mey (W.indica ).MethodsThe content of genkwanin in W.indica was determined by HPLC with Alltech C_(18) (250 mm×4.6 mm, 5 μm) column. A mixture of methanol and 0.2% phosphoric acid solution (55∶45)was used as mobile phase, the flow rate was 1.0 ml·min-1 and UV detection wavelength was at 346 nm. Temperature was 35 ℃ and sample size was10 μl.ResultsThe linear relationship was good within the range of 0.24～2.40 μg (r=0.999 8). The average recovery was 100. 57% , RSD was 1.76%. ConclusionThe method is simple and accurate with good separation. The results are sensitive and reproducible and may be used in the quality control of genkwanin in Wikstroemia indica(L.)C.A.Mey.
Key words：HPLC；Wikstroemia indica；Genkwanin；Determination
中药了哥王为瑞香科植物了哥王Wikstroemia indica(L.)C.A.Mey.的干燥根或根皮,主产于两广，浙江、江西也有出产。性味苦寒、微辛，有毒。功能清热解毒，化痰散结，消肿止痛。主治风湿性关节炎，淋巴结炎，瘰疬，痈肿，跌打损伤，具有抑菌、抗病毒抗炎镇痛、止咳祛痰等作用。本品有毒，对皮肤有刺激性，所含树脂有强烈的泻下作用［1］，文献报道含有黄酮、多糖类、酸性树脂、挥发油、甾体类、皂苷等成分。了哥王含有南荛酚、牛蒡苷元、松脂酚、山萘酚等多种化学成分，还含芫花素、西瑞香素等［2］。了哥王提取液中有效成分的含量测定目前尚无研究报道，因此，我们采用高效液相色谱法测定了哥王超声提取液中芫花素的含量。现报道如下。
1 仪器与材料
1.1 仪器Didnex-P680 HYPERLINK /product/list.asp?proclass=0keyword=高效液相色谱仪ji=1 高效液相色谱仪；PDA-100 Photodiote Array 检测器；CQ2250 HYPERLINK /product/list.asp?proclass=0keyword=超声波清洗仪ji=1 超声波清洗仪(上海声源仪器有限公司)；FA1104N HYPERLINK /product/list.asp?proclass=0keyword=电子分析天平ji=1 电子分析天平(上海精科天平厂)。
1.2 试药芫花素对照品由广州药物研究所提供，经归一法标定，含量为 99.3%，流动相甲醇为色谱纯(美国Tedia公司)，水为二次蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
1.3 药材了哥王购于广州市清平药材市场，由广东药学院天然产物化学系王定勇教授鉴定为了哥王Wikstroemia indica(L.)C.A.Mey的干燥根茎。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 HYPERLINK /product/list.asp?proclass=0keyword=色谱柱ji=1 色谱柱为Alltech ODS柱(4. 6 mm ×250 mm, 5 μm,)；流动相为甲醇-0.2 %磷酸溶液(体积比55∶45)；流速1.0 ml·min-1；检测波长346 nm；进样量10 μl；柱温：35℃；在此条件下供试品中芫花素成分能与其他成分达到较好的分离。对照品、供试品在约19 min相同时间有一色谱峰，见图1。
2.2 对照品溶液的制备精密称取芫花素对照品12 mg，置于50 ml的容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成0.24 mg·ml-1的对照品溶液，经0.45 μm微孔滤膜过滤，即得。
2.3 供试品溶液的制备取了哥王生药
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