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实验一果蝇实验技术
观察果蝇生活史四个时期 观察果蝇成虫外形和鉴别雌雄性 观察突变体 各挑取10对三隐果蝇和10对黑体果蝇到新培养瓶中饲养,贴上标签,写明品系、性状、日期、实验者姓名,饲养两周后供下次实验使用。 清洗果蝇培养瓶 今日实验任务: 品系(性状) 姓名 日期 下一周实验内容 实验三 微核检测技术 课前问题: 1.在正式开始遗传学实验之前,你对本门实验了解多少?你期望的遗传学实验是什么样的? 2.本实验室现有以下五个黑腹果蝇品种,如果要求你用这些品种设计实验来验证遗传学三大定律以及伴性遗传规律,你如何设计实验? 野生型(+) 黑体(b,2号染色体) 白眼(w,X染色体) 残翅(vg,2号染色体) 三隐(白眼(w),小翅(m),焦刚毛(sn),X染色体) 实验一 果蝇实验技术 一、实验目的 1.掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法,熟悉常见突变型。 2.了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化。 二、实验内容和步骤 果蝇(fruit fly)是双翅目(Diptera)昆虫,属果蝇属(genus Drosophila),约有3000多种。通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)。 用果蝇作为实验材料有许多优点: 1. 饲养容易。在常温下,以玉米粉等作饲料就可以生长,繁殖。 2. 生长迅速。十二天左右就可完成一个世代,每个受精的雌蝇可产卵400~500个,因此在短时间内就可获得大量的子代,便于遗传学分析。 3. 染色体数少。只有4对。 4. 唾腺染色体制作容易。横纹清晰,是细胞学观察的好材料。 5. 突变性状多,而且多数是形态突变,便于观察。 生活周期长短与饲养温度的关系 (一)生活周期的观察 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 卵→幼虫 幼虫→成虫 57天 18天 8天 6天 5天 4天 图1 果蝇的生活史 1.卵 2.一龄幼虫 3. 二龄幼虫 4.三龄幼虫 5.蛹 6.成虫 生活史周期 (二)果蝇的形态特征和常见的突变类型 1.果蝇雌雄性别的鉴别 雌果蝇 个体较大 腹部末端较尖 腹部背面有五条黑条纹 外生殖器较简单,有阴道板和肛上板等结构 腹部腹面有6个腹片 无性梳 雄果蝇 个体较小 腹部末端较钝 腹部背面有三条黑条纹,最后一条极宽,并延伸到腹面 外生殖器较复杂,有生殖弧、肛上板、阴茎等结构 腹部腹面有4个腹片 前腿跗节上有性梳 果蝇雌雄外形判别 :(体形大小) 雌 雄 腹部体节数目:雌果蝇6节,腹部底部为产卵管,呈现圆锥状凸出。 腹部体节数目:雄果蝇4节,腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。 雄果蝇在前肢先端第二节具有性梳 2.一些常见的突变性状 突变性状 基因符号 染色体号 性状特征 棒眼 B 1 复眼呈狭窄垂直棒形,小眼数少 焦刚毛 sn 1 刚毛弯曲,似烧焦的头发 卷曲翅 Cy 2 翅膀向上卷曲,纯合致死 小翅 m 1 翅膀小,长度不超过身体 白眼 w 1 复眼白色 黑檀体 e 3 身体呈乌木色,黑亮 黑体 b 2 体黑色,比黑檀体深 黄体 y 1 全身呈浅橙黄色 残翅 vg 2 翅明显退化,部分残留,不能飞 叉毛 f 1 毛和刚毛分叉且弯曲 猩红眼 st 3 复眼呈明亮猩红色 墨色眼 se 3 羽化时眼呈褐色并深化成墨色 野生型:体色灰,翅膀呈圆卵型,静止时平放交叉重叠,长度约为腹部长度的两倍 双翅目:一对翅膀+一对平衡棒 野生型:翅膀有横隔脉 野生型:眼睛颜色为砖红色,饱满圆形 野生型:刚毛——头胸部以及复眼的周围具有平直,先端略弯的长型粗黑硬毛 棒眼(B) 白眼(w) 朱红眼(v) 墨黑眼(se) 短刚毛(Sb) 叉毛(f) 卷翅(Cy) 残翅(vg) 短翅(dp) 小翅(m) 无横隔脉(cv) 黄体(y) 黑檀体(e) (三) 果蝇麻醉方法1.麻醉剂 2.方法 3.死亡果蝇的标志 (四)果蝇的饲养 1.果蝇培养基成份(100ml) 水 80ml 玉米粉 8.25g 糖 6.2g 琼脂 0.6g 丙酸 0.5ml 酵母 0.7g 2.配制方法 玉米粉 糖 琼脂 3.灭菌、灌装 灭菌温度121℃ 灭菌时间25-30分钟 4.果蝇继代培养
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