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观察动植物细胞有丝分裂实验
* Ⅰ、实验原理、目的要求、材料用具(P39) Ⅱ、方法步骤 (1)根尖培养 (2)装片制作:解离→漂洗→染色→制片 (3)观察:低倍镜观察(根据分生区细胞的特点找到分生区细胞)→高倍镜观察(根据有丝分裂各期特点找出各期并仔细观察各期染色体变化的特点) (4)绘图:绘制有丝分裂各期染色体变化简图 实验:观察植物细胞的有丝分裂 Ⅲ、实验成功的关键和注意事项 (1)、实验成功的关键 ①取材:一定要剪取生长旺盛、带有分生区的根尖,注意剪取的时间,一般在上午10时至下午2时洋葱根尖有丝分裂活跃期。取材长度为根尖的2-3mm。 ②充分解离:解离液(15%的盐酸∶95%的酒精溶液=1∶1),室温,3-5分钟→根尖酥软(时间要掌握好,短则细胞没有完全分离,在压片时难以形成单层细胞;长则可能使根尖烂掉)。 ③压片充分:用镊子弄碎根尖并压片(不能错动)→使组织细胞充分分散开成为单层细胞→细胞在盖玻片下分散成云雾状 (2)、注意事项: ①培养根尖时应置于温暖的地方,每天至少要换一次水(由于水中微生物的活动和根细胞的活动,使水中代谢产物增多,水质受到污染,不利于根的生长,甚至烂根)。 ②剪取的根尖的长度不要超过3mm。 ③解离目的:使组织细胞分离开;杀死并固定细胞。 ④漂洗要充分,其目的是保证下一步的染色效果。 ⑤染色:染液及浓度(质量浓度0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸洋红)要掌握好,染色时间为3-5分钟→染色体或染色质被碱性染料染成深色,以与细胞中其它结构相区别,从而便于观察。 ⑥压片时用力要恰当。过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则细胞未充分分散开而重叠,二者都影响观察。压片时拇指用力要垂直,避免盖玻片移动。 ⑦加盖玻片时,防止产生气泡。 ⑧在观察装片时,可见处于间期的细胞往往最多,这是由于在细胞周期中间期的时间最长。 ⑨用高倍镜观察时,在一个视野中一般不会同时有各个时期的细胞,可通过移动装片去寻找,但要注意玻片移动的方向(与物像的方向相反) ⑩细胞在解离时已被杀死,已永久地处于细胞周期中的某个时期,所以不可能看到某个细胞连续分裂的过程。 注意: 三种浓度:盐酸是质量分数浓度(15%)、酒精是体积分数(95%)、染液是质量浓度(0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸洋红)。 三个时间:解离3-5min、漂洗10min、 染色3-5min。 *
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