细胞外微环境与肿瘤的浸润转移技术方案.ppt

肿瘤胞外酸性微环境与肿瘤的浸润转移 安彩艳 内蒙古医科大学临床医学研究中心 2013.12.25 1 肿瘤组织酸性微环境的形成 在生理状态下，正常组织细胞外pH值 (extracellular pH, pHe)介于7.2-7.4之间 恶性肿瘤组织的胞外环境通常发生酸化，pHe介于6.5-6.9之间，即肿瘤细胞胞外微环境普遍存在酸化。 肿瘤细胞胞外酸性微环境形成原因 1. 与肿瘤细胞代谢特点和组织结构、生长等密切相关。恶性肿瘤在生长过程中，由于组织增生过快，肿瘤组织的血管发育不良使局部组织严重缺氧； 2. 加之疾病相关贫血的存在导致肿瘤血管运输能力下降，进一步加剧了肿瘤组织缺氧。 3. 缺氧的状态阻碍了细胞通过线粒体呼吸链获取能量。 为了满足能量需求，肿瘤细胞转向糖酵解代谢，这导致葡萄糖消耗的增加及乳酸和质子的过量生成。为了能够在胞外酸性环境下生存，甚至增殖，肿瘤细胞在进化过程中发展出一套适应性机制。这些适应性机制包括钠氢交换蛋白1(Na+/H+ exchanger 1, NHE1)，碳酸酐酶Ⅸ（carbonic anhydrases Ⅸ，CA Ⅸ）和单羧酸转运体（monocarboxylate transporter，MCT）的表达上调等。这些pH调节蛋白的上调使肿瘤细胞胞内过量生成的质子和乳酸及时被运送到细胞外，这一方面维持了胞内pH的稳态和肿瘤细胞基本的生理功能，另一方面也导致了肿瘤胞外酸性微环境的形成。 2 肿瘤细胞对胞外酸性环境的感知 肿瘤细胞对胞外酸性环境的感知是指，肿瘤细胞胞膜表面特异性的受体或离子通道，能够在酸性环境下被活化，进而激活其下游的胞内信号通路，影响细胞功能。研究发现，细胞膜上的某些G蛋白偶联受体或离子通道能够在酸性环境下被活化，因此，它们被认为具有质子感知功能。 3 肿瘤浸润转移受到胞外酸性环境调节 体内和体外实验证实，细胞暴露在酸性pH环境下，其浸润能力增强。因此，酸性调节肿瘤浸润假说（The acid-mediated invasion hypothesis）被提出。该假说认为，氢离子会沿浓度梯度从肿瘤组织扩散至其邻近的正常组织，促进肿瘤-基质交界的组织重建。酸性微环境对于正常组织具有毒性，它通过蛋白酶促进胞外基质降解，通过释放VEGF促进血管新生并抑制对肿瘤抗原的免疫应答。癌细胞在进化过程中发展出一套适应性机制，例如NHE1和CA Ⅸ的表达上调等，使它们能够在酸性的胞外环境下生存。而正常细胞缺乏这种适应性能力，因此，它们在酸性环境下逐步凋亡坏死，胞外基质被降解，癌细胞则不断增殖并浸润到这些开放的空间。 酸性调节肿瘤浸润假说认为，胞外酸性环境诱发了肿瘤的生长和浸润。在一项最新研究中，研究者采用活体镜检法对肿瘤浸润和癌周pH值进行监测，发现肿瘤浸润程度高的区域与低的pH值区域相对应，进一步有力证实了酸性调节肿瘤浸润假说。 肿瘤转移与肿瘤细胞迁移能力密切相关 肿瘤转移是其最致命的一个方面。肿瘤转移是恶性肿瘤细胞向原发肿瘤以外的部位的生长过程，是肿瘤病人死亡的最主要的原因之一。 肿瘤转移的关键步骤是其细胞迁移能力的获得，肿瘤转移程度与其细胞迁移能力呈正相关。 细胞迁移是一个复杂的、动态的过程，包括细胞前端伸出板状伪足，细胞前端伪足和细胞外基质形成新的细胞黏着，胞体收缩，细胞尾端和周围基质黏着解离等一系列过程。随着研究的不断深入，研究人员发现酸性环境可能在肿瘤细胞迁移的每一个具体环节对其构成影响。 3.1肿瘤细胞骨架蛋白的动态组装 肿瘤细胞的迁移和浸润需要肿瘤细胞沿着其长轴的极化和板状伪足的形成。板状伪足是一个肌动蛋白富集的结构，它能够突入细胞外基质。分支微丝网络的组装构成了细胞骨架形成的驱动力，肌动蛋白结合蛋白cofilin和gelsolin都是微丝组装和解离过程中的关键调节物。在细胞迁移过程中，gelsolin被认为帮助细胞尾端肌动蛋白的再循环，而cofilin调节了细胞前端肌动蛋白的动态变化，这两种细胞迁移中的关键调节物均对pH敏感，cofilin在碱性pH中的活性高于酸性，而gelsolin能被高的质子溶度激活，而且它的活化需要一定的Ca2+浓度。 在迁移细胞中，myosinⅡ主要在细胞尾端被酸性pH和高的Ca2+浓度激活。Myosin激活后也参与了pH敏感的RhoA/ROCK信号通路，这一通路在细胞粘着的解离和细胞尾端胞体收缩中起作用。 PH依赖的细胞骨架动态变化的不对称性也被TRPM7通道调节，TRPM7是一个对α-激酶活性调节起重要作用的阳离子通道。TRPM7的活化导致了其与myosinⅡA之间的以Ca2+和激酶依赖方式相互作用。胞质中Ca2+越低，α-激酶活性越高。