04第四章酶课稿.ppt

第四章 酶(enzyme） 一、酶是生物催化剂 酶是一类由活性细胞产生的生物催化剂 生物体内一切生化反应都需要酶的催化才能进行！ 性能远远超过人造催化剂。 1926年，美国科学家萨姆钠（J. B. Sumner, 1887-1955）从刀豆种子中提取出脲酶的结晶，并通过化学实验证实脲酶是一种蛋白质。 20世纪80年代，美国科学家切赫（T. R. Cech, 1947-）和奥特曼（S. Altman, 1939-）发现，少数RNA也具有生物催化作用。 二、酶能加速细胞内的化学反应  酶是催化剂：降低反应活化能，提高反应速度。 具有高效性，可提高106-1012倍。 三、酶不能改变化学反应平衡 催化剂的特点：只提高反应速度、不改变反应平衡。且反应前后不消耗。 酶也具有相同的特点。 四、酶的催化反应具有专一性 酶对催化的底物具有不同程度的选择性。 单一类物质（相对专一） 例如 羧肽酶（催化蛋白质C端氨基酸水解脱落的酶） 单一物质（绝对专一）（如苹果酸脱氢酶等等） 单一物质单一立体构型（“超级专一”） 如 β-葡萄糖氧化酶 五、酶的组成 1、酶主要是蛋白质，极少数为RNA。 酶主要是蛋白质也容易失活。 2、酶的组成 单纯酶：只含有蛋白质。例如：淀粉酶、核糖核酸酶等。 结合酶：由蛋白质和非蛋白质类的小分子物质组成。 酶蛋白与辅助因子单独存在时均无催化活性，只有这两部分结合起来组成复合物才有催化活性，此复合物也被称为全酶。 全酶 = 酶蛋白 + 辅助因子 （结合蛋白质） （蛋白质部分） （非蛋白质部分） 酶蛋白与辅因子间一般是1:1的定量关系。 酶蛋白功能：决定酶的专一性 辅助因子功能： 改变并稳定活性中心 改变底物化学键稳定性（底物—酶的催化对象） 协助活性中心基团快速转移（进出） 3、酶的活性部位 酶催化反应时需要有完整的结构，但直接参与反应的只是酶蛋白分子中的一小部分，称为酶的活性中心（部位）。 六、某些RNA具有催化活性 具有催化活性的RNA称ribozyme（核酶） 一、 酶的命名 催化的底物名 +反应类型 + 酶 例如 琥珀酸脱氢酶、天冬酰胺合成酶 蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶 ？ 水解酶一般省去“水解”二字 （二）. 以蛋白质结构分类 单体酶：酶由一条肽链组成 寡聚酶：酶为寡聚蛋白 多酶络合物：几个独立的酶组合起来形成络合体，催化一个系列反应。脂肪酸的B-氧化 第三节 酶促反应动力学 一、化学反应动力学 化学反应动力学研究哪些内容？ 反应速度 包括速度的测定、影响速度的因素 反应速率：以单位时间内反应物或生产物浓度的改变来表示。 测定单位时间内底物的消耗量 测定单位时间内产物的生成量（较为准确） 二、 酶活力与酶促反应速度 酶促反应动力学研究：酶活力与影响酶活力的因素 酶活力就是酶催化反应的能力。 人的能力——能办多大的事 酶的活力——能催化多快的反应 通常以测出的酶促反应速度表示酶的活力； （一）.酶促反应速度的测定方法 （二）.活力单位与比活力 p113 1976年对酶活性单位定义为：1min能转化1μmol底物的酶量，即1IU=1μmol/min 。 目前国内外常省略国际二字，即将IU简写为U。 　　1979年另一定义：每秒（s）钟催化转化1 mol底物的酶量，即1katal=1mol/s。我国法定计量单位制中，酶催化活性单位为katal， IU和katal间关系如下：1katal=6×107U 酶产品质量评价中常使用比活力 单位质量酶产品中酶活力称比活力。 U/mg酶蛋白 U/mL酶蛋白 酶活力测定实例 首先 确定反应条件 20℃、pH=7，底物浓度 6g/l（过量），加入2mg固体脂肪酶 第二 确定活力单位 如每分钟催化1μmol底物 1 U = 1μmol/min 第三 测算反应初速度 作产物甘油随时间增加的曲线，量出反应初速度值 ，换算为脂肪的消耗速度 如 8μmol/min 第四 换算活力 (8μmol/min) / (1μmol/min)=8 U 第五 计算比活 8 U /2mg酶蛋白=4 U /mg酶蛋白 二、 影响酶促反应速度的因素 （作单因子考虑） 稳态时 ES的生成速度=消耗速度: k1[E][S]=k2[ES] + k3[ES] E的质量平衡方程: [E]=[Et]