2。2。1动物细胞培养和核移植技术(上课用)分解.ppt

资料：烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？ 细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 细胞贴壁 问题探讨： （三）动物细胞培养的条件 * 专题2 细胞工程 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术 一、动物细胞培养 （一）动物细胞培养的过程 结合图2-16，阅读P44最后一段至P46第一段结束。 找出关键词并理解它们的含义。 细胞贴壁 细胞的接触抑制 原代培养 传代培养 细胞悬液 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 接触抑制 通常取动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 因为其代谢旺盛、分裂能力强，更容易培养。 说明细胞与细胞间的主要物质是蛋白质 1. 动物细胞培养对培养的材料有要求吗？ 3. 用胰蛋白酶处理，组织就会分散成单个 细胞，说明了什么？ 2. 为什么在培养前要将组织分散成单个细胞？ 成块的组织不利于培养，分散了做成 细胞悬浮液利于培养。 4.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？ 如果长时间作用也会消化细胞膜蛋白， 因此必须控制好胰蛋白酶的处理时间。 5.人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？ 保存10代以内的细胞。 因为10－50代部分细胞的细胞核型可能发生 变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。 原代培养： 直接从动物体内取出的动 物组织消化后的初次培养 传代培养： 原代培养的细胞出现接触 抑制后，贴满瓶壁的细胞 需要重新用胰蛋白酶等处 理，然后分瓶继续培养， 让细胞增殖。 分类：10代内的细胞；10-50代；50代以后。 （一）动物细胞培养过程 动物胚胎或幼龄 动物的组织、器官 细胞悬浮液 胰蛋白酶 原代培养 传代培养 单个细胞 培养液 细胞贴壁、接触抑制 再重复上述过程 （一般传至10代，有的10-50代，有的能不死） （二）动物细胞培养的概念（P44） 就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 原理：细胞增殖 想一想：动物细胞培养的基本原理是什么？ 多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养动物细胞应该模拟内环境的哪些条件呢？ 无菌、无毒 全部的营养物质 适宜的温度和PH值 必要的气体条件 （三）动物细胞培养条件 能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？ 1、无菌、无毒的环境 对培养液和培养用具进行无菌处理；在培养液中添加一定量的抗生素;定期更换培养液； 2、营养 葡萄糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等 动物血清、血浆 3、温度和pH 温度36.5±0.5度，pH7.2～7.4 4、气体环境 O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） O2是细胞代谢所必需的。 CO2维持培养液的pH。 补充合成培养基中缺乏的物质 获得细胞 或细胞产物 细胞的全能性 细胞数目增多 一般为植物体 培养结果 快速繁殖、培育脱毒作物等 培养目的 葡萄糖、动物血清 促生长因子 蔗糖、植物激素 培养基特有成分 液体培养基 固体培养基 培养基性质 细胞增殖 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 植物细胞和动物细胞培养的比较 （四）动物细胞培养技术的应用 1、生产生物制品 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等； 3、用于检测有毒物质及毒性； 2、动物基因工程离不开动物细胞的培养； 4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、 药理等方面的研究。 阅读P46-47 3．关于动物细胞培养的叙述，不正确的是 A.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开来 B.通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养 C.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细胞全部衰老死亡 D.用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织 练一练~~~ 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 利用动物体细胞核移植技术 动物核移植： 将动物的一个细胞的 ，移入一个已经去掉细胞核的 中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。 用核移植的方法得到的动物。