细胞核与染色体案例.pptVIP

一、核被膜 内外两层平行单位膜组成。每层厚约7.5nm。 （一）结构 外核膜：面向胞质，表面有核糖体，常与粗面内质网相连。外核膜可以看成是内质网膜的一个特化区。另外，细胞骨架成分常与外核膜相连，起着固定、网罗作用。 内核膜：面向核质，有核纤层蛋白B受体。核纤层紧贴其内表面。 核周隙：内外膜之间，宽20～40nm，连通内质网腔。 核孔：内外核膜的融合而成，环状开口，核孔周围核膜特称孔膜区，镶嵌核孔复合体。含跨膜糖蛋白gp210、P62. 核被膜的结构 （三）核被膜在细胞周期中的崩解与装配 核被膜在细胞周期中发生有序的去装配与重装配： 分裂期双层膜崩解为单层膜泡，核孔复合体解体，核纤层去装配； 分裂末期，核被膜围绕染色体重新形成 细胞周期调控因子、RanGTP酶及结合蛋白调节 磷酸化解体，去磷酸化重建。 重组的新核膜来自旧核膜 实验证据：将变形虫培养在含有3H-胆碱的培养基中，使核被膜被标记 核移植至去核变形虫中，追踪观察一个细胞周期，发现子代细胞核膜有放射性标记 上述单层膜泡已发现两种 内核膜小囊泡含LBR（核纤层蛋白B受体）组装时先结合染色体 孔膜区小囊泡含gp210（核孔复合体特有的跨膜糖蛋白）组装时后结合形成核孔复合体。 说明核被膜的重组不是随机的，而是具有区域特异性。 扫描电镜观察的核孔复合物照片 （一）NPC结构模型 相对NPC轴心为八重对称，相对于核膜平面不对称， 结构进化上高度保守。 胞质环（外环）：8条短纤维对称分布伸向胞质 核质环（核篮）:核篮侧伸出8条纤维，周期性分布8个颗粒组成的环状结构，并相互交叉成网络 辐：分为柱状亚单位、腔内亚单位和环带亚单位 栓（中央颗粒）:位于核孔中心，参与核质交换。 （三） NPC的功能 通过NPC的被动扩散 NPC是一圆形亲水通道，功能直径为9-10nm，有的可达12.5nm，长约15nm。10nm以下的物质原则上可以自由通过。 40-60×103可自由穿过。 通过NPC的主动运输 1. 对运输颗粒大小的限制。主动运输的功能直径比被动运输大，约10～20nm，甚至可达26nm，其有效直径的大小是可调节的。 2.通过NPC的主动运输是一个信号识别与载体介导的过程，需ATP，并表现饱和动力学特征。 3.双向运输 亲核物质的核输入 RNA及核糖体亚单位的核输出 第一个被确定NLS序列的蛋白质是SV40的T抗原。其野生型氨基酸序列为Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val。 典型的NLS是一个短肽，由4～８个氨基酸残基组成，富含带正电荷的Lys和Arg，通常还有Pro。 不同的NLS尚未发现共同的特征序列。 NLS序列可定位在亲核蛋白的不同部位，连续也可分散存在。 入核信号是蛋白质的永久性部分,在引导入核过程中,并不被切除, 可以反复使用, 有利于细胞分裂后核蛋白重新入核。 亲核蛋白核输入示意 RNA及核糖体亚单位的核输出 载体介导的主动运输 需分子伴侣参与 存在核输出信号（NES） rRNA，以RNP形式输出（RNApolymerase I） 5S rRNA、 tRNA由蛋白质介导转运 （RNApolymerase III） hnRNA加工后，以成熟的mRNA形式出核 （RNApolymerase II） 5‘端具有m7 GpppG帽子结构时, 即被定位于细胞质, 而没有帽子结构则定位在细胞核。 核纤层 分布于内核膜与染色质之间紧贴内核膜的一层蛋白网络结构。由一层特殊的中间纤维呈正交网络组成，切面观呈片层结构，整体观呈球形结构。 一般认为，核纤层为核膜及染色质提供结构支架，维持核孔的位置和核被膜的形状，并介导核膜与染色质之间的相互作用。 核纤层是一种高度动态的结构。 核纤层在细胞的有丝分裂中和核被膜的崩解与重组密切相关。 一、核仁形态 纤维中心(fibrillar centers，FC)：是被致密纤维包围的一个或几个浅染、低电子密度的圆形结构小岛，主要成分为rDNA、RNA聚合酶Ⅰ和转录因子，是rDNA储存位点。真核生物5SrRNA基因不定位在NOR。嗜银蛋白与rDNA结合起调节作用。 致密纤维组分(dense fibrillar component，DFC)：呈环形或半月形包围FC，实验证明rRNA以最高电子密度出现在密集纤维区，因此认为该区是rRNA转录活跃的区域，加工。特异结合蛋白fibrillarin、核仁素、Ag-NOR蛋白。 一、核仁形态 颗粒组分(granular component，GC)：代谢细胞主要结构。由直径15-20 nm的高电子密度颗粒构成，主要成分是RNA和蛋白质，是不同加工阶段的RNP。核糖体亚单位装配、成熟和存储位点。 核仁基质（n