细胞核与染色质吉大案例.ppt

细胞核与染色质 王飞 fei@jlu.edu.cn Introduction- Nucleus 最大的细胞器(organelle) Cell biology concern about… 细胞生物学： 基本结构 组成成分 核内生命活动的组织、协调 生理意义 基因的分子生物学： 染色质包装 从DNA到mRNA 非编码RNA 遗传学 生物化学 内容提要 细胞核基本结构 核被膜 核基质 染色质 核仁 核体 核被膜的结构组成 核被膜 (nuclear envelope) 核膜(nuclear membrane) 外核膜 核糖体颗粒 与内质网相连 内核膜 无核糖体颗粒 LBR 核周间隙 与内质网腔相通 核孔 内外膜融合 孔膜区 核孔复合体(NPC) 孔膜区域组装的复杂蛋白复合物 核质物质运输 核纤层(nuclear lamina) 核纤层蛋白(lamin A-C) 纤维状网络结构 结构支撑 调节基因表达 调节DNA损伤修复 核基质 核骨架 蛋白质纤维网架结构体系 真核生物细胞核起源于原核细胞入侵？融合？ 染色质 分子生物学：万倍压缩 核仁与核体 核仁：染色体的核仁组织区 RNA 蛋白 核糖体的装配工厂 核体：RNA 蛋白 RNA修饰 RNP组装 核糖体装配 核内分子生物学过程 染色质结构调节 DNA复制、修复、重组 基因转录及其调控 RNA 加工 短片：chromosome coil 短片：DNA replication 短片：strand exchange 短片：gene transcription 核孔复合体-核质转运通道 跨内外核膜 亲水通道 核孔直径 80-120nm 复合体直径120-150nm 自由扩散 顺浓度梯度 有效直径 9-10nm 40-60KD 无需能量 主动运输 信号肽 需能量 不去折叠 双向同时运输 转运速度极快（~500个/s） 核孔复合体转运的生物大分子 转入(Import) 组蛋白 DNA聚合酶 RNA聚合酶 基因调控蛋白 RNA加工蛋白 snRNP 转出(Export) tRNA mRNA rRNP snRNA 短片：Rapid nuclear importation 核孔复合体的结构 30余种蛋白亚基 多拷贝组合 八边形对称结构 核孔复合体转运的分子尺寸限制 无定形结构域(unstructured region) 无序屏障 主动运输与信号肽 蛋白分选：信号肽 核分选：入核信号肽(NLS) 出核信号肽(NES) 任何位置 完成分选后不剪切 主动运输模型 通道：NPC 出入口：蛋白纤维 搬运工：核转运受体 (nuclear transport receptor) 辅助：FG-repeats Ran GTP 核转运受体对靶蛋白的识别 直接结合 多种受体蛋白 识别不同信号肽序列 其他结合位点 间接结合 适配蛋白(adaptor protein) GTPase：Ran 发动机： 水解GTP 导航： 控制方向 调控因子： Ran-GAP Ran-GEF Ran控制转运方向的原理 Ran控制的NTR分子开关 几种重要大分子的核孔转运 结构蛋白： histone 核糖体结构蛋白 NLS 入核 RNA ：成熟mRNA 核糖体亚基 snRNA 需向导分子 出核 转录调控蛋白，向导蛋白： NLSNES 需要时入核 不需要时出核 RNA的出核转运 向导分子：具有NES的辅助蛋白 质量检查：正确折叠和加工的RNA分子才能 获得出核资格 核膜的崩解与组装-已学 发生于细胞分裂过程中 Lamin A 单体形式游离 Lamin B 与核膜小泡结合 磷酸化： p34cdc2 N端Ser22 C端Ser392 核膜的崩解与组装 1 找到染色体 前期核膜崩解后： 核被膜片段(双层核膜+膜蛋白) NPC蛋白+NIR Lamin Ran Ran-GAP 末期染色体上： Ran-GEF → Ran-GTP Cloud ← NIR+NPC蛋白 ↓ 去磷酸化Lamin → NPC ← 核被膜片段