核糖体课件-2.pptVIP

第四节蛋白质的生物合成 三核糖体 一.核糖体的概念 核糖核蛋白体,简称核糖体(ribosome) 核糖体是一种颗粒状的结构，没有被膜包被，主要成分是蛋白质和RNA，其功能是将模板mRNA与携带不同氨基酸的tRNA有效地组装在一起，催化合成不同种类的多肽链。是合成蛋白质的细胞器 二.细胞内的分布 分布在细胞内蛋白质合成旺盛的区域，其数量与蛋白质合成的程度有关。 例如：指数生长期的细菌中，数以万计 饥饿状态的细胞中，仅有几百个 三.存在部位 ? 细胞 ? 细胞器 ? 高度特化的细胞内没有核糖体 例如：哺乳动物成熟的红细胞 四、核糖体的基本类型与成分 （一）基本类型 ?按存在的方式分为： ?附着核糖体：真核细胞ER、外核膜；原核细胞质膜内侧。 ?游离核糖体：呈游离状态，分布于细胞质基质中。 ?按沉降系数分为： ?70S的核糖体：原核细胞核糖体、真核细胞线粒体和叶绿体。 ?80S的核糖体：真核细胞内的线粒体。 （二）主要成分 原核生物核糖体 r蛋白质： 约占1/3，分布核糖体表面 rRNA ： 约占2/3，位于核糖体内部 真核生物核糖体 r蛋白质： 约占2/5，分布核糖体表面 rRNA ： 约占3/5，位于核糖体内部 基本成分 70S核糖体 80S核糖体 五 结构与功能的分析方法 ?离子交换树脂可分离纯化各种r蛋白； ?纯化的r蛋白与纯化的rRNA进行核糖体的重组装， 显示核糖体中r蛋白与rRNA的结构关系 ?双向电泳技术可显示出E.coli核糖体在装配各阶段中， 与rRNA结合的蛋白质的类型 ?双功能的交联剂和双向电泳分离可用于研究r蛋白在 结构上的相互关系 ?电镜负染色与免疫标记技术结合，研究r蛋白在核糖 体的亚单位上的定位。 ?对rRNA，特别是对16S rRNA结构的研究 ?70S核糖体的小亚单位中rRNA与全部的r蛋白关系 的空间模型 ?同一生物中不同种类的r蛋白的一级结构 均不相同，在免疫学上几乎没有同源性。 ?不同生物同一种类r蛋白之间具有很高 的同源性， 并在进化上非常保守。 ?蛋白质结合到rRNA上具有先后层次性。 ?核糖体的重组装是自我装配过程 ?16SrRNA的一级结构是非常保守的 ?16SrRNA的二级结构具有更高的保守性： 臂环结构(stem-loop structure) ?rRNA臂环结构的三级结构模型 核糖体上具有一系列与蛋白质 合成有关的结合位点与催化位点 ?与mRNA的结合位点 ?与新掺入的氨酰-tRNA的结合位点——氨酰基位点，又称A位点 ?与延伸中的肽酰-tRNA的结合位点——肽酰基位点，又称P位点 ?肽酰转移后与即将释放的tRNA的结合位点——E位点(exit site) ?与肽酰tRNA从A位点转移到P位点有关的转移酶 (即延伸因子EF-G)的结合位点 ?肽酰转移酶的催化位点 ?与蛋白质合成有关的其它起始因子、延伸因子和 终止因子的结合位点 六 核糖体蛋白质与rRNA的功能 ?在核糖体中rRNA是起主要作用的结构成分 ?r蛋白质的主要功能 在核糖体中rRNA是起主要作用的结构成分 ?具有肽酰转移酶的活性； ?为tRNA提供结合位点(A位点、P位点和E位点)； ?为多种蛋白质合成因子提供结合位点； ?在蛋白质合成起始时参与同mRNA选择性地结 合以及在肽链的延伸中与mRNA结合； ?核糖体大小亚单位的结合、校正阅读(proofreading)、 无意义链或框架漂移的校正、以及抗菌素的作用等 都与rRNA有关。 r蛋白质的主要功能 ?对rRNA 折叠成有功能的三维结构是十分重要的； ?在蛋白质合成中, 某些r蛋白可能对核糖体的构象 起“微调”作用； ?在核糖体的结合位点上甚至可能在催化作用中, 核 糖体蛋白与rRNA共同行使功能。 核糖体的功能 按照mRNA的遗传信息，以tRNA为媒介，将特定的氨基酸连接成多肽或蛋白质 小亚基上的mRNA结合位点和识别,大亚基上的氨酰-tRNA结合位点（A位）、肽基转移部位（P位）和转肽酶中心 * * * * * * * * 真核细胞：大量 原核细胞：大量 支 原 体：数以百计 线粒体 叶绿体 50S 30S rRNA L蛋白： 31种 rRNA ：16SrRNA S蛋白：21种 23SrRNA 5SrRNA 60S 40S rRNA L蛋白： 49种 r