(TP+ALB测定)课件资料.ppt

●试剂 　　　 BCG试剂 　pH4.2琥珀酸缓冲液 10mmol/L 溴甲酚绿 16umol/L 叠氮钠 0.50mmol/L Brij-35（聚氧化乙烯月桂醚） 0.125g/L 白蛋白标准液 52.5 g/L 样品号（样品1和样品2） 【标本】 BCG法测定血清或血浆白蛋白操作歩骤 加入物(ml) U1-2 S2 B2 待检血清或血浆 0.01 白蛋白标准液 0.01 纯水 0.01 BCG试剂 2.0 2.0 2.0 混匀，用半自动生化分析仪立即在波长630nm处比色，用蒸馏水调零，读取校准管和测定管的吸光度值并记录。 【操作歩骤】 血清或血浆白蛋白（ｇ/L） 【结果计算】 测定管吸光度-空白管吸光度 校准管吸光度-空白管吸光度 ×白蛋白标准液浓度 = 【报告方式】 血清或血浆(浆) 白蛋白： △ △. △ g/L 【注意事项】 1.控制反应液的pH是本法测定的关键。试剂混浊，pH范围超过4.1-4.3，试剂不能用。 2.BCG与白蛋白的反应强度和环境温度有关。 3.由于在30s内呈色对白蛋白特异（快反应），BCG与血清或血浆混合后，在30s读取吸光度，可明显减少非特异性呈色反应。 4.叠氮钠有防腐的作用；聚氧化乙烯月桂醚（Brij-35） 可提高蛋白质与染料的结合力及溶解度，提高呈色的稳定性，也可用其他表面活性剂，灵敏度和线性范围不变。 【临床意义】 1.血清或血浆白蛋白浓度增高 常见于严重脱水所致的血浆浓缩。 2.白蛋白浓度降低 在临床上比较重要和常见，通常与总蛋白降低的原因大致相同。急性降低主要见于大出血和严重烧伤；慢性降低见于肾病蛋白尿、肝功能受损、肠道肿瘤及结核病伴慢性出血、营养不良和恶性肿瘤等。血清或血浆白蛋白低于20g／L，临床上出现水肿。 3.A／G比值：某些病人可同时出现白蛋白减少和球蛋白升高的现象，严重者A／G比值1.0，这种情况称为A／G比值倒置。 举例：ALB测定操作顺序如下： 第一步：准备试管三支，分别标明 (ALBU1-U2、S2、B2) 第二步：分别加待检血清或血浆0.01ml于U1、U2中 第三步：加ALB校准液0.01ml于S2中 第四步：加纯水0.01ml于B2中 第五步：在ALbU1、U2、S2、B2每一管 中各加试剂2ml 第六步：将各管分别混匀 第七步：立即比色 第八步：比色(B管调零)。（ALB-630nm) 第九步：记录A值 第十步： 记算 第十一步：报告结果 思考题 1.何为双缩脲反应或试剂？其各组分的作用？ 2.总蛋白及白蛋白测定的主要临床意义？ 3.总蛋白、白蛋白测定方法特点？ 实验报告 班级： ﹍姓名：﹍ 学号：﹍ 一、实验项目名称 二、目的 三、原理 四、器材及试剂 五、操作歩骤 六、实验结果及计算 七、讨论(对实验结果的分析、自己的体会和收获等) * 实验二 双缩脲法测定血清或血浆总蛋白（TP）溴甲酚绿法测定血清或血浆白蛋白（ALB） 临床生化教研室 刘素兰 雷燕 （一）双缩脲法测定血清或血浆总蛋白 掌握：双缩脲法测定血清或血浆总蛋白的基本原理及操作 熟悉：血清或血浆总蛋白测定的临床意义 了解：双缩脲法测定血清或血浆总蛋白的特点及注意事项 【目的】 【原理】---血清或血浆总蛋白测定 　　所有蛋白质都含有肽键（-CO-NH-)。在碱性溶液中，肽键与铜离子结合，生成稳定的紫红色络合物。根据紫红色络合物在540nm的吸光度在一定范围内与蛋白质的含量呈正比关系，经与同样处理的蛋白标准液比较，即可以求得蛋白质含量。 紫红色络合物（A540nm） 肽键+Cu2+ 碱性 双缩脲法 优点： ① 操作简便、快速 、试