畜禽疫病防治第一章第二节病毒技术范本.pptVIP

Department of Microbiology, Harbin Medical University 第二节 病毒 病毒的概念 病毒的形态与结构 病毒的干扰和血凝现象 病毒的培养 病毒病的实验室诊断方法 一、病毒的概念 是一类非细胞型微生物 主要特点 体积非常微小，需在电子显微镜下观察 结构简单，无细胞结构，只含一种类型核酸（DNA或RNA） 严格的细胞内寄生，只能在活细胞中增殖 二、病毒的形态与结构 病毒的大小: 观测仪器：电镜 测量单位：纳米（nm） 病毒的形态 砖形（如痘病毒） 球形（大多数病毒) 子弹形（如狂犬病病毒） 蝌蚪形（噬菌体） 杆形（多见于植物病毒） 病毒结构示意图 核酸 位于病毒的中心部分，又称为芯髓 核酸是病毒的遗传物质，为病毒的复制、遗传和变异等提供遗传信息 衣壳 是包围在病毒核酸外面的一层蛋白质外壳 功能 保护病毒核酸 参与感染过程 具有抗原性 囊膜 有些病毒的核衣壳外面还包有一层由类脂、蛋白质和糖类构成的囊膜 纤突：某些囊膜表面的刺状突起 如流感病毒囊膜表面的血凝素和神经氨酸酶 囊膜的作用 保护：保护核衣壳 与病毒吸附宿主细胞有关 流感病毒 二、病毒的增殖 病毒增殖的方式——复制 病毒的复制过程 吸附 穿入 脱壳 生物合成 组装与释放 病毒增殖示意图 三、病毒的干扰和血凝现象 病毒的干扰现象 病毒的血凝现象 （一）病毒的干扰现象 干扰现象的概念 干扰素的概念 干扰素的功能 干扰现象的实践意义 干扰现象的概念 当两种病毒感染同一细胞时，可发生一种病毒抑制另一种病毒复制的现象，称为病毒的干扰现象 干扰素的概念 干扰素是机体活细胞受病毒感染或干扰素诱生剂的刺激后产生的一种低分子量的糖蛋白，可随血液循环至全身，被另外的细胞吸收后，细胞内可合成抗病毒蛋白质，抑制入侵病毒的增殖 干扰素的功能 抗病毒 免疫调节 抗肿瘤 干扰现象的实践意义 在接种疫苗时，应减小或避免干扰现象对免疫效果的影响 干扰素的临床应用（兽医）：可用于某些病毒病的预防和治疗 （二）病毒的血凝现象 血凝现象： 有些病毒的表面有血凝素，能与某些动物的红细胞表面受体结合，从而出现红细胞凝集现象，称为病毒的血凝现象 血凝抑制现象： 当病毒与相应的抗病毒抗体结合后，能使红细胞的凝集现象受到抑制，称为病毒血凝抑制现象 血凝现象的应用 ND、AI等病毒性传染病的免疫监测 ND、AI等病毒性传染病的诊断 四、病毒的培养 病毒不能在无生命的培养基上生长，必须在活细胞内增殖 动物接种 鸡胚接种 组织培养方法 动物接种 动物选择 本动物 实验动物 最理想的是无菌动物或无特定病原动物 动物接种的用途 病原学检查，传染病诊断，疫苗生产及疫苗效力检验等 鸡胚接种 禽胚选择 最好选择SPF胚 禽胚接种的用途 家禽传染病的诊断、病毒病原性的研究以及生产诊断抗原和疫苗等方面 接种途径 卵黄囊接种 尿囊腔接种 绒毛尿囊膜接种 组织培养方法 组织细胞培养是用体外培养的组织块或单层细胞分离增殖病毒 优点：离体活组织细胞不受机体免疫力影响，易于病毒生长；便于人工选择多种敏感细胞供病毒生长；易于观察病毒的生长特征；便于收集病毒作进一步检查 五、病毒病的实验室诊断方法 病料的采集、保存和运送 病毒的包涵体检查 病毒的分离培养 病毒的动物接种试验 病毒的血清学试验 分子生物学技术 1.病料的采集、保存和运送 病料采集原则 无菌采样 适时采样 适量采样 病毒病料的保存： 除冷冻外，还可放在50%甘油磷酸盐缓冲液中保存；液体病料可直接加一定量的青、链霉素或其他抗生素，以防细菌和霉菌的污染。 病毒病料的运送 尽快送检，如需保存不要超过4d 于4℃冷藏运送 2.病毒的包涵体检查 对能形成包涵体的病毒性传染病，具有重要的诊断意义 如狂犬病内基氏小体检查 3.病毒的分离培养 病毒的培养：被接种的动物、禽胚或细胞出现死亡或病变时，可应用血清学试验等技术对病毒进一步鉴定 5.动物接种试验 验证所分离到的病毒的致病作用 接种对象 本动物 实验动物 6.分子生物学技术 核酸探针技术 PCR 畜禽疫病防治 第1章 疫病的病原 第二节 病毒 病毒与细菌大小比较 球形 子弹形 砖形 蝌蚪形 杆形 核酸 衣壳 囊膜 无囊膜病毒 有囊膜病毒 病毒的结构及化学组成 HA——血凝素 NA —— 神经氨酸酶 吸附 宿主细胞 穿入 脱壳 生物合成 组装 释放 干扰素抗病毒的特点 广谱抗病毒 动物种属特异性 干扰素抗病毒对机体的意义 早期抗病毒 应用血凝试验（HA）试验）和血凝抑制实验（HI试验） 内基氏小体 4.血清学试验 凝集试验、琼脂扩散试验等 * * * *