分子生物学实验用试剂.docVIP

实验课需要的主要试剂 序号 名称 数量 价格 备注 1 无水乙醇 500mL×10 2 醋酸钠 500g 3 冰乙酸 500mL 4 氯仿 500mL×2 5 氢氧化钠 100g 6 异丙醇 500mL×2 7 异戊醇 500mL 8 氯化钠 100g 9 葡萄糖 100g 10 盐酸 10mL 11 EDTA 200g 12 SDS 100g 13 胰蛋白胨 500g 320.00 14 酵母粉 500g 170.00 15 Tris 200g 16 饱和酚 250mL×2 110.00 17 Amp 1g 20.0 18 Xgal 200mg 240.00 19 IPTG 1g 50.00 20 EB 250mg 21 琼脂糖 100g 22 琼脂 23 连接酶 24 限制酶 25 离心管（1.5ml、0.5ml、0.2ml） 26 枪头（1ml、100ul、20ul） 27 一次性手套 28 液氮 29 需配置的试剂： Tris母液： 称取Tris（三羟甲基氨基甲烷，分子量121.1）60.55克。加重蒸水400毫升，加热搅拌溶解，称为Tris母液。 10mol/L NaOH溶液 称取氢氧化钠（分子量40）20克，先用40毫升重蒸水搅拌溶解后，再加重蒸水定容至 50毫升。 500mmol/L EDTA（pH8.0）溶液 称取EDTA－Ｎa2（乙二胺四乙酸二钠，分子量372.24）18.6克，先用60毫升重蒸水，加10毫升10mol/L NaOH溶液，加热搅拌溶解后，再用10mol/L NaOH溶液调pH至8.0，加重蒸水定容至100毫升，103.4kPa灭菌20分钟。 20％ SDS溶液 称取固体SDS（十二烷基硫酸钠，分子量288.44）20克，加70毫升重蒸水于42℃水溶解，加重蒸水定容至100毫升。 3mol/L NaAc溶液 称取无水乙酸钠（分子量82.03）24.6克 或称取3H2O·CH3COONa 40.82克 ，先加入重蒸水80毫升，加热搅拌溶解，再加重蒸水定容至100毫升，103.4kPa灭菌20分钟。 5mol/L Nacl溶液 称取氯化钠29.22克，先加入重蒸水80毫升，加热搅拌溶解，再加重蒸水定容至100毫升，103.4kPa灭菌20分钟。（因难溶而难配） 1mol/L Tris-HCl（pH7.6）溶液： 量取Tris母液80毫升，用盐酸（分子量36.46）调节pH至7.6（大约加入盐酸6毫升），加重蒸水定容至100毫升，103.4kPa灭菌20分钟。 TE缓冲液： 取1 mol/L Tris-HCl（pH7.6）2毫升，500mmol/L EDTA（pH8.0）0.4毫升，加ddH2O定容至200毫升。 50倍TAE缓冲液（50×0.04mol/L Tris-Ac，50×1mmol/L EDTA）： 称取Tris 121.1克，先用150毫升重蒸水加热搅拌溶解后，28.5毫升冰乙酸，加50毫升500mmol/L EDTA（pH8.0），用冰乙酸（约2-4mL）调pH至8.0，然后加重蒸水定容至1000毫升。 200mmol/L 葡萄糖溶液 称取葡萄糖（分子量198.17）1.98克，加重蒸水溶解后定容至50毫升，置冰箱储存。 氯仿：异戊醇：乙醇（80:4:16） 按比例配置共计300毫升。 SDS提取缓冲液（100mmol/L Tris·Cl，20mmol/L EDTA，500mmol/L NaCl、1.5% SDS） 1mol/L Tris-HCl（pH7.6）溶液 50mL 500mmol/L EDTA（pH8.0）溶液 20 mL 5mol/L Nacl溶液 50 mL 20％ SDS溶液 37.5 mL 加ddH2O至500毫升。 Sol Ⅰ（50mmol/L葡萄糖，10mmol/L EDTA ，25mmol/L Tris﹒Cl（pH 8.0）） 200mmol/L 葡萄糖溶液 25 mL 500mmol/L EDTA（pH8.0）溶液 2 mL 1mol/L Tris-HCl（pH7.6）溶液 2.5mL 加ddH2O至100毫升。