破坏细胞壁和细胞膜,使胞内产物得到最大程度的释放 目的 影响细胞破碎的因素: 1 细胞壁的结构 2 破碎方法 第二节 细胞破碎 一 细胞壁的结构 革兰氏阳性菌的细胞壁主要由肽聚糖层(约20-80nm)组成 革兰氏阴性菌肽聚糖层较薄,仅2-3nm,在肽聚糖层外还有两层外壁层。外壁层约8-10nm 可见革兰氏阳性菌细胞壁较厚,较难破碎! 霉菌的细胞壁较厚,约100-250nm 酵母的细胞壁比革兰氏阳性菌的细胞壁厚,更难破碎 机械法 匀浆法 珠磨法 超声波 化学法 化学试剂处理 酶解法 制成丙酮粉 物理法 干燥 冻融 渗透压冲击 二 破碎方法 机械法 高压匀浆法:适用于酵母菌、大肠杆菌、巨大芽孢杆菌和黑曲霉 等。不适用于高度分枝的微生物 高速珠磨法:利用玻璃小珠与细胞悬液一起快速搅拌,由于研磨 作用,使细胞破碎 超声波破碎法:实验室常用影响因素:频率、液体温度 和粘度、 处理时间等 French Press 压榨压榨是一种温和的、彻底破碎细胞的方法。在1000×105Pa~2000×105Pa 的高压下使几十毫升的细胞悬液通过一个小孔突然释放至常压,细胞将彻底破碎。这是一种较理想
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