橘皮黄色素的提取与检测.docVIP

橘皮黄色素的提取与检测 一、基本原理 实验的目的和意义： 我国柑橘栽培面积世界第一，产量仅次于美国、加拿大，位居世界第三。柑橘果皮产量约占果实产量的25％一40％。目前，我国柑橘皮除少量的用于提取香精油及中药 陈皮 外，大部分作为废物被丢弃，不但浪费了资源，而且污染了环境。 橘皮色素是一类性能较稳定、安全可靠的天然色素，可代替人工合成色素用于食品着色，同时还具有很多生物活性成分。如橘皮色素中有一种存在于眼内的类胡萝卜素，能防治白内障及因年龄增加导致的眼部黄褐变性。研究证明，橘皮色素对眼睛的主要生理功能是作为抗氧化剂和光保护剂。橘皮色素是人体血液中主要的类胡萝卜素之一，可防止癌细胞的生长，尤其能够治疗皮肤癌，还能增强机体免疫能力。另外，橘皮黄色素具有理气健脾嘲、去湿化痰之功效嗍，可治疗胸腔涨闷、食少吐泻等症状。所以从橘皮中提取的油溶性黄色素不仅是单纯的着色剂，而且还是食品的强化营养剂、香味剂和保健食品的重要配料之一。 色素结构特征和性质： 橘皮色素种类较多，主要含有类胡萝卜素 Carotenoids ，是一类由40个碳原子组成、含多个异戊二烯结构的多种脂溶性植物色素的总称。橘皮色素可分为水溶性色素 如橘黄素A 和脂溶性类胡萝卜素色素 如橘黄素B 。 水溶性色素易溶于水，一般呈淡黄色，溶于极性有机溶剂，难溶于非极性有机溶剂。在自然光下稳定，且热稳定性良好，在pH为2—10范围内稳定性好。在较强的碱性环境中 pH 11 溶解性好且颜色加深。脂溶性类胡萝卜色素主要由柠檬烯与类胡萝卜素组成，还富含维生素E和稀有元素硒，易溶于乙醇、乙醚、正已烷、油脂、四氯化碳、三氯甲烷等有机溶剂 。与水溶性色素相比，其热稳定性与光稳定性较弱。由于脂溶性类胡萝卜色素分子中含有羧基，在酸性下呈游离羧酸状态，故溶解性较差，在碱性条件生成盐，溶解度较大。 常见的橘皮黄色素提取方法有机溶剂提取法、碱提取法、微波提取法、超临界、流体萃取法以及超声波提取法等工艺。浸提法是根据原料被提取成分的极性和共存杂质的理化特性的不同，遵循相似相溶原则，使有效成分从原料表面或组织内部向溶剂转移的传质过程。 有机溶剂浸提法提取橘皮色素的关键是浸提剂的选择，常用的浸提剂有乙醇、六号溶剂油、三氯甲烷、乙醚和石油醚等有机溶剂。 二、实验仪器与试剂 仪器：真空干燥箱 PU-8700紫外可见分光光度计 循环水式真空泵 FZ102型微型植物试样粉碎机 电子天平 圆底烧瓶 布氏漏斗 分液漏斗 减压蒸馏装置（蒸馏瓶、克氏蒸馏头、毛细管、温度计及冷凝、接收器等） WZS-1阿贝折射仪 WXG-6自动旋光仪 材料与试剂：干柑橘皮 75%乙醇溶液 无水硫酸镁 无水乙醇 10%氢氧化钠溶液 六号溶剂油[] 盐酸 石油醚 三、提取 1 方法 柑橘皮中的色素有两种，水溶性色素和脂溶性色素。水溶性色素可用水、乙醇、甘油等极性溶剂提取，脂溶性色素可用乙醇或多种其他有机溶剂（如）提取。工艺上通常采用乙醇作提取剂将两种色素同时从柑橘皮中提出，然后再用其他有机溶剂从中萃取分离出脂溶性色素 ←油层（上）等体积碱液洗2次 ↓ ←六号溶剂油萃取←回收乙醇 ←乙醇层（下）三倍体积无水乙醇 水洗至中性→无水硫酸镁干燥→过滤→减压蒸馏→干燥→油溶性色素→称重 混匀→低温离心→浓缩→干燥→水溶性色素→称重 2 提取步骤 2.1 原料的选择与预处理　　 柑橘皮中的色素主要存在于外果皮中，因此，提取色素的柑橘皮应尽可能选择外皮比例高、色泽鲜艳的柑橘品种，可以用新鲜柑橘皮、提过精油的柑橘皮或干柑橘皮，要求无霉变腐烂～5mm小碎块，再放入浸提。浸提 　　％的乙醇进行常温浸提，乙醇加到完全淹没柑橘皮为止，浸提时间。若加以缓慢搅拌，浸提时间可适当缩短。为防止乙醇挥发损失，浸提应在密封容器内进行。浸提后的过滤采用抽滤。滤渣留待后续提取果胶，滤液进行下一步处理。 　　为降低的用量，用减压将浸提液中85％～90％的乙醇蒸馏回收循环使用。时温度应控制在60 ℃ 以下，以防色素被高温破坏。到剩余液只有原液10 ％～15 ％时，停止，并让其冷却到常温，转入中。萃取 　　在中分别用等体积萃取3 次。萃取在密闭容器中进行，中速搅拌，萃取时间约30min ，然后静置分层，分离出上层，合并3 次萃取的。萃取后，绝大部分脂溶性色素进入中，萃余层则留下水溶性色素和残留的少量脂溶性色素。水溶性色素产品获取 　　将萃余物用3 倍体积的无水乙醇稀释均匀，静置至不溶性悬浮物完全沉降，然后去除沉降物。将澄清液放减压蒸馏中减压蒸馏，蒸馏温度控制在60℃ 以下，蒸出的乙醇返回使用。蒸馏到几乎无乙醇馏出时，停止蒸馏，将深红色剩余物移至真空干燥箱内，在60 ℃ 以下真空干燥去除残留乙醇和水分，得到的红黑色粉末即为