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lncRNA在前列腺癌早期诊断中的应用 　　【摘要】长链非编码RNA（lncRNA）是一类长度大于200个核苷酸，不具备蛋白质编码功能的RNA分子。PCA3是目前研究较成熟的PCa相关lncRNA，在前列腺癌（PCa）患者直肠指检（DRE）后尿液、前列腺液及活组织中均高表达。PCa的早期诊断对于尽早采取有效的治疗及获得最佳预后有重要作用，目前PCa的早期诊断尚缺乏有效的检测方法，本文就lncRNA在PCa早期诊断中的应用价值进行综述，为临床预防、早期诊断PCa提供新策略。 　　【关键词】lncRNA；前列腺癌；PCA3；早期诊断 　　随着对人类基因组研究的不断深入，研究表明人类基因组中仅不到2%的序列为蛋白质编码序列，超过98%的序列能被转录成非编码RNA（non-coding RNA）。非编RNA分为管家非编码RNA（housekeeping non-coding RNA）和调控非编码RNA（regulatory non-coding RNA）， 而调控非编码RNA按其分子大小又分为短链非编码RNA、中链非编码RNA和长链非编码RNA（long non-coding RNA，lncRNA）三大类[1]。近年来，lncRNA已经引起了许多研究者们的关注。lncRNA一般是指大于200个核苷酸的非编RNA，无或很少有编码蛋白质的功能，包括正义、反义、双向、基因内、基因间5种类型[2]。 　　Okazaki等[3]在2002年在对小鼠全长互补DNA文库大规模测序首次定义一类新的转录物，即lncRNA。随着研究的进展，人们发现lncRNA本身虽不编码蛋白质，但它可以以RNA形式调控蛋白编码基因在表观修饰水平调控、转录水平调控和转录后水平调控等多个层面的表达水平[4]。近年的研究发现，lncRNA与许多疾病相关，尤其与肿瘤的发生发展、转移、预后关系密切，如消化系统肿瘤、泌尿生殖系肿瘤、呼吸系统、脑肿瘤等；与内科疾病，如慢性阻塞性肺部疾病、系统性红斑狼疮、心力衰竭等也有一定关系。在泌尿系肿瘤中，lncRNA与肾上腺肿瘤、肾脏肿瘤、膀胱肿瘤、PCa均相关，尤其是近年的研究发现的PCA3与PCa的早期诊断密切相关，具有很大的临床应用价值。 　　自20世纪80年代以来，诊断Pca主要是检测前列腺特异性抗原（PSA），研究发现其特异性较低，检测结果出现大量假阳性，导致许多不必要的前列腺组织活检，增加了患者痛苦。在基因水平对PCa的研究发现，许多lncRNA与PCa的发生发展及转移有着紧密关系，且能提供更准确的诊断及治疗依据。如PCGEM1、PRNCR1、PlncRNA-1等[5]。下面就目前研究较成熟的PCa特异性非编码RNA―PCA3对于PCa早期诊断的应用价值作一分析。 　　1999年，PCA3首次被Bussemakes等[6]发现，命名为“DD3”。PCA3是位于人染色体9q21―22基因的转录产物，全长约25kb，由4个外显子组成。通过对PCA3反转录-聚合酶链反应（PT-PCR）分析，及对比其他18种正常人组织中均无扩增产物，证明了PCA3在前列腺组织特异性表达，具有前列腺组织特异性。它的发现为PCa早期诊断和靶向治疗奠定了基础。 　　2003年，Hessels等[7]通过实时荧光定量 PCR测定DRE后尿液及前列腺液中PCA3含量，显示该方法可以准确测定PCa患者PCA3含量，且敏感性和特异性较高，从而避免了如前列腺穿刺等侵入性的检查，为临床诊断PCa提供新方法。有研究表明，DRE后尿液中PCA3检测实验得出灵敏度和特异度分别为66%和76%，而血清PSA特异度为47%[8]。说明PCA3相对于PSA更能准确诊断PCa患者。 　　目前临床上诊断PCa除了血清PSA，最主要的手段是前列腺组织病理活检，但活检假阴性率较高。2013年Busetto等[9]发现，PCA3结合多参数核磁共振成像（mMRI）检查可有效减少不必要的穿刺活检，提高穿刺阳性率及PCa诊断的准确性。DRE后收集的尿液标本离心后，使用RT-PCR方法检测沉渣细胞中PCA3及PSA的表达水平发现，PSA在BPH和PCa细胞中的表达水平大约相同，而PCA3在PCa中的表达水平远远高于在良性前列腺组织中的表达水平，说明PCA3在PCa具有很高的特异性。有研究者将PCA3ncRNA和PSA mRNA表达比值（PCA3/PSA）称作PCA3评分[10]。研究表明PCA3评分与PCa肿瘤的体积显著相关，与患者的年龄、肿瘤侵润程度及双侧和多灶性呈正相关，而与前列腺癌Gleason评分或病理分级无关[11]。而与前列腺癌Gleason评分或病理分级无关。患者活检阳性率为14%时的PCA3评分小于5，而活检阳性率大于70%时的PCA3评分大于100，说明PCA3评