病理实验技术考试题.docVIP

1 简述HE切片制备的程序？（常规石蜡切片制作技术步骤？） 取材 固定 脱水、透明、浸蜡、包埋 切片 染色 HE染色步骤？ HE染色的步骤：二甲苯I10min 二甲苯II10min 100%乙醇I2min 100%乙醇II2min 95%乙醇2min 80%乙醇2min 70%乙醇2min 苏木素染液1-5min 0.01%盐酸20s 自来水 稀氨水（1%）泛蓝30s 自来水 伊红染液1-5min 70%乙醇30s 80%乙醇30s 95%乙醇1min 100%乙醇I2min 100%乙醇II2min 二甲苯I2min 二甲苯II2min 封片 3用什么方法鉴别胶原纤维和肌纤维？其染色步骤？ 鉴别胶原纤维和肌纤维的方法是VG染色和Masson三色染色。 VG染色操作方法：组织固定10%甲醛业，常规脱水包埋切片。 切片脱蜡至水。 weigert氏铁苏木素液5-10分钟。 流水稍洗。 1%盐酸酒精迅速分化。 流水冲洗数分钟。 Van Giesom氏染色液1-5分钟 倾去染液，直接用95%酒精分化和无水酒精脱水，二甲苯透明。 中性树胶封闭。 VG染色结果：胶原纤维呈鲜红色；肌纤维胞质及红细胞黄色；细胞核：蓝黑色。 MASSOM染色步骤：组织常规固定、脱水、包埋、切片。 切片脱蜡至水。 Weigert氏铁苏木素液5-10分钟。 流水稍洗。 1%盐酸酒精迅速分化。 流水冲洗数分在封闭。 丽春红酸性品红液5-10分钟。 蒸馏水稍冲洗。 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。 直接用苯胺蓝液或亮绿液5分钟。 1%冰醋酸处理1分钟。 95%酒精脱水多次，二甲苯透明。 中性树胶封片。 Masson三色染色结果：胶原纤维绿色或蓝色；肌纤维及红细胞：红色；细胞核：蓝色。 4免疫组化染色流程？ 组织取材、固定、脱水、透明、包埋。 石蜡切片的制备、脱蜡及水化。 抑制内源性过氧化物酶活性。 PBS洗涤切片。 抗原修复或暴露抗原。 PBS洗涤切片。 用于二抗来源相同的动物非免疫正常血清孵育切片。防止抗体的非特异性吸附。 用特异性一抗孵育切片。 PBS洗涤切片。 用针对一抗的生物素化的二抗孵育切片。 用PBS洗涤切片。 滴加SP试剂或ABC试剂。 PBS洗涤切片。 DAB或AEC显色。 自来水洗涤切片，终止显色。 用苏木素做核复染。 切片脱水、透明，树胶封片。