甘草等中药提取物对中波紫外线诱导的小鼠皮肤损伤保护作用的初筛实验的研究.pfg.docVIP

兰州大学硕士研究生学位论文 中文摘要 目的研究甘草、红景天、黄芪提取物对中波紫外线（ＵＶＢ）辐射ＢＡＬＢ／ｃ小鼠皮 肤的保护作用；研究三种中药提取物对ＵＶＢ辐射小鼠皮肤组织中ＨＳＰ２７、ＨＳＰ７０、 ＩＬ．１０表达水平的影响。探讨三种中药对ＵＶＢ辐射小鼠皮肤的保护作用及可能的作 用机理，为天然防晒剂的开发和实际应用提供初步理论依据和实验参考数据。 方法甘草、红景天、黄芪提取物用蒸馏水配制为５％与１０％溶液，５４只Ｂ ＡＬＢ／ｅ 小鼠被随机分为９组，背部剃毛，于剃毛部位皮肤涂用上述相应药物，２０ｍｉｎ后给 予５００ｍＪ／ｅｒａ ２ＵＶＢ辐射，１次／日，连续１个月，颈椎脱臼处死动物；肉眼观察各组 小鼠背部皮肤一般形态，ＨＥ染色法观察各组小鼠背部皮肤组织形态；ＲＴ－ＰＣＲ法检 测不同处理条件下小鼠背部皮肤组织中ＨＳＰ２７及ＨＳＰ７０ｍＲＮＡ表达水平；ＥＬＩＳＡ 法检测不同处理条件下小鼠背部皮肤组织中ＩＬ．１０水平。 结果ＵＶＢ辐射后小鼠背部表皮出现红斑、颜色加深、增厚、脱屑，表皮层增 厚、真皮层炎性细胞浸润；５％、１０％甘草溶液处理后仅稍许皮肤增厚，无脱屑、颜 色加深，组织形态较接近正常组织；５％、１０％红景天与５％、１０％黄芪溶液处理后 有轻度皮肤增厚、出现脱屑、颜色加深，组织形态较对照组有部分改善；经内参校 正后，ＲＴ－ＰＣＲ法示ＵＶＢ慢性辐射后小鼠皮肤中ＨＳＰ２７、ＨＳＰ７０表达水平较对照组 增高，不同剂量甘草、红景天、黄芪处理后可上调ＨＳＰ２７、ＨＳＰＴ０表达水平（Ｐ＜０．０５）， 表达水平无剂量依赖关系（Ｐ＞０．０５）；ＵＶＢ慢性辐射后小鼠皮肤中ＩＬ－１０表达水平 较对照组增高，不同剂量甘草、红景天、黄芪处理后可上调ＩＬ－１０表达水平（Ｐ＜ ０．０５），表达水平无剂量依赖关系（Ｐ＞０．０５）。 结论甘草、红景天、黄芪提取物水溶液局部外用对ＵＶＢ诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠皮 肤光老化现象有保护作用，其中以甘草提取物水溶液效果较为显著；其保护作用可 能部分与诱导ＨＳＰ２７、ＨＳＰ７０及ＩＬ—１０表达有关。 关键词甘草；红景天；黄芪；中波紫外线；ＢＡＬＢ／ｃ小鼠；ＨＳＰ２７；ＨＳＰ７０；ＩＬ－１０ Ｖ 兰州大学硕士研究生学位论文 Ａｂｓｔｒａｃｔ ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ ｏｆ Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ，Ｒｈｏｄｉｏｌａ ｒｏｓｅａ  Ｌ，ＡＭ ｉｎ ＢＡＬＢ／ｃ ｍｉｃｅ ｓｋｉｎ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ｂ（ＥＶａ）．Ｔｏ  ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｔｏｐｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ ｏｆ ｔｈｉｓ ｔｒａｄｉｔｉｏｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ｏｎ  ＨＳＰ２７， ＨＳＰ７０ ａｎｄ ＩＬ一１０ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｋｉｎ ｏｆ ＢＡＬＢ／ｃ ｍｉｃｅ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ Ｂ（ｔＹＶＢ）．Ｔｏ  ｅｘｐｌｏｒｅ  ａｎｔｉ－ＵＶＢ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｖｅ ｏｆ ｔｈｉｓ ｔｒａｄｉｔｉｏｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｎ ＢＡＬＢ／ｃ ｍｉｃｅ ｓｋｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ ａｎｄ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｄａｔａ ｆｏｒ ｔｈｅ ｎａｔｕｒａｌ ａｎｄ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ．  ｓｕｎｓｃｒｅｅｎ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｍｅｔｈｏｄｓ：５４  ＢＡＬＢ／ｃ ｍｉｃｅ ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｎｉｎｅ ｇｒｏｕｐｓ ｗｉｔｌｌ ｂａｃｋ ｈａｉｒ ｓｈａｖｉｎｇ，ｓｈａｖｉｎｇ  ａｒｅａ  ｏｆ ｔｈｅ ｓｋｉｎ ｗｅｒｅ ｔｏｐｉｃａｌ ｕｓｅｄ ５％ｏｒ  １ ０％ｗａｔｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ，Ｒｈｏｄｉｏｌａ  ｒｏｓｅａ  Ｌ，ＡＭ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．５００ｍＪ／ｃｍ２ ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ Ｂ（ＵＶＢ）Ｗａｓ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ａｆｔｅｒ  ２０ｍｉｎ．Ｍａｎｉｐｕｌａｔｅｄ ｉｎ  ｔｈｉｓ ｗａｙ ｆｏｒ ｃｏｎｓｅｃｕｔｉｖｅ ３０ｄ．Ｔｈｅ ｓｋｉｎ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ａｆｔｅｒ  ｏｎｅ  ｍｏｎｔｈ．Ｖｉｓｕａｌ ｏｂｓｅｒｖｍｉｏｎ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｌ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｂａｃｋ ｓｋｉｎ