精氨酸加压素逆转Aβ-%2c25-35-引起的在体大鼠海马长时程增强的压抑.pfg.docVIP

山西医科大学硕士学位论文 精氨酸加压素逆转Ａ Ｂ ｚ峭引起的在体大鼠海马长时程增强的压抑 摘要 阿尔茨海默病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ＡＤ）是一种不可逆的原发性神经系统退行性疾病， 临床表现为进行性学习、记忆和认知功能障碍，智力减退乃至完全痴呆。ＡＤ的主要病理特 征有：脑内出现高密度的老年斑（ｓｅｎｉｌｅ ｐｌａｑｕｅ。ｓＰ）、神经原纤维缠结（ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙ  ｔａｎｇｌｅｓ， ＮＦＴ）以及大量神经元丧失等。据分析，ＳＰ的主要成分是由３９－４３个氨基酸构成的淀粉样Ｂ一 蛋Ｉ刍（Ａｍｙｌｏｉｄ ｐ－ｐｒｏｔｅｉｎ，Ａｐ）。目前，有关Ａ Ｂ及其有效片段如Ａｐ２５．３５、ＡＰ３１．３５的神经毒作用 己有广泛报道，故一般认为，ＡＤ的发病与ＡＢ在脑内的沉积以及由此产生的神经毒性作用 有关。然而，对于Ａ Ｓ的神经毒性作用机制还不完全清楚，所以目前对ＡＤ的防治仍无十分 有效的方法。 海马是中枢神经系统中与学习和记忆关系较为密切的结构之一，也是ＡＤ时ｓＰ主要聚 集的部位之一。海马的长时程增强（１０ｎｇ ｔｅｒｍ  ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ，ＬＴＰ）是由强直刺激作用于海马兴 奋性突触传递通路时所诱发的一种突触传递效率长时间增强的现象，被认为是一个重要 的、反映信息储存过程中突触传递发生可塑性变化的电生理指标，与某种学习记忆机制有 关。转基因小鼠实验证明，海马ＬＴＰ的损伤与记忆行为的伤害密切相关，故海马ＬＴＰ不仅被 认为是突触可塑性的功能指标之一，也是研究认知功能障碍疾病如ＡＤ的理想模型。海马双 脉冲易化（ｐａｉｒｅｄ  ｐｕｌｓｅ ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎ，ＰＰＦ）是由前后两个刺激作用于突触传递通路时引起的突 触传递短时间增强现象，也被认为是反映突触可塑性的指标之一，其形成机制与突触前神 经末梢递质释放的增加有关。 精氨酸加压素（ａｒｇｉｎｉｎｅ ｖａｓｏｐｒｅｓｓｉｎ，ＡＶＰ）是一种神经内分泌激素，作用广泛，不仅可 以调节体内水电解质平衡及调节血压，存在于中枢神经系统中的ＡＶＰ对学习记忆的调节过 程也具有重要的意义。有研究表明ＡＤ患者脑内和血浆内ＡＶＰ水平与正常人相比有明显减 少，提示ＡＤ的发病可能与ＡＶＰ在脑和血浆中的水平下降有关。此外ＡＶＰ对老年人记忆的改 善已有临床报道，提示ＡＶＰ可能具有对抗Ａ Ｂ神经毒性的作用，可能在防治ＡＤ、改善记忆 障碍方面发挥重要作用。但迄今为止，关于ＡＶＰ的实验主要集中在观察动物行为学的改变 上，有关电生理学方面的机制性研究，特别是ＡＶＰ对海马ＬＴＰ的效应研究甚少，并且仍然 存在分歧。此外，虽然有实验表明Ａ８对ＬＴＰ具有伤害性作用、ＡｖＰ则可能与之相反，但 两者合用后，ＡＶＰ是否能够逆转或部分拮抗Ａ Ｂ对ＬＴＰ的压抑效应至今仍未见报道。因此， 本实验的目的主要是进一步确定脑室内注射ＡＶＰ是否能影响海马ＬＴＰ，以及ＡＶＰ是否可以 保护神经元免受ＡＢ对突触传递可塑性如ＬＴＰ产生的伤害作用，从而为ＡＤ的发病机制以及 ＡＤ的防治提供可能的新思路。 山西医辩大学硪士学位论文 考虑到ＡＤ患者记忆力下降和痴呆的发生与海马结构的受累如严重萎缩有关，而ＡＶＰ 也可以通过海马发挥增强记忆的作用，本实验采用细胞外记录的方法，以在体大鼠海马 Ｓｃｈａｆｆｅｒ侧枝－ＣＡｌ锥体细胞辐射层（Ｓｃｈａｆｆｅｒ  ｃｏｌｌａｔｅｒａｌ／ｓｔｒａｔｕｍ ｒａｄｉａｔｕｍ）突触传递通路上诱导 的场兴奋性突触后电位（ｆＥＰＳＰｓ）的幅度改变为指标，观察了经侧脑室给予不同浓度的ＡＶＰ、 ＡＢ的２５．３５片段（Ａｐ２５－３５）、及同时给予两种药物时对在体条件下基础性ｉＥＰＳＰｓ、高频刺激 后引发的ＬＴＰ以及双脉冲引起的ＰＰＦ的影响，试图证实ＡＶＰ在突触传递效率方面的神经调制 作用、Ａ昆ｓ．３５在突触传递效率方面的神经毒性作用、以及ＡＶＰ是否具有保护神经元免受 Ａ［３２５－３５弓ｌ起的ＬＴＰ压抑作用。 结果显示：（１）在稳定记录基础性ｆＥＰＳＰｓ３０ｍｉｎ的基础上，脑室内注射５Ｌ容积的Ａｐ２５－３５ （２５ｎｍ０１）或不同浓度的ＡＶＰ（Ｏ．Ｉｎｍｏｌ，ｌｎｍｏｌ，１０ｎｍ０１）后，３０ｒａｉｎ内各组ｉＥＰＳＰｓ幅度与给 药前相比或与对照组相比均无明显变化。（２）在对照组（ｎ＝１２），给予短串高频刺激（ＨＦＳ，频 率２００ Ｈｚ，波宽５０雌，脉冲数２０，重复３次，间隔３０秒）后观察到ＬＴＰ的出现，如以ＨＦＳ前的 也ＰｓＰｓ幅度为１００％，刺激后即刻增加到２０６士８．３％；ＨＦｓ后３０ｒａｉｎ及６０ｍｉｎ时，ｆＥＰＳＰｓ幅度仍 分别保持在１６４士６．３％和１５８士７．００６。（３）ＨＦＳ前３０ｍｉｎ脑室注射２５ｎｍｏｌ Ａ陀５．３５后，ＨＦｓ引发的 ＬＴＰ被明显抑制，ＬＴＰ值在ＨＦＳ后即刻、３０ｒａ