CellCultureProcessScaleUp-SectionI-William精选.ppt

Titre Wet cell weight 实例 2-2 P. Pastoris fermentation- 0.25L to 30L Courtesy of Rachel Bareither David Pollard, Merck Rahway 实例3：一次性反应器在灭活性疫苗中的应用 实例 4 E.coli -ambr250 OD600 is scalable to 15l 150l scales * 放大的目的是“重现”。 * * * 三传理论对工艺放大具有重要作用 几何相似包括放大的体积倍数和径高比及桨径/罐径比的一致性。 * VS的意义 通风强度 通风搅拌的强弱 通风准数Na Q/nDi3的意义 物理意义：反应器中空气线速度与搅拌液体的线速度之比 表征通风与搅拌的相对强度 按体积溶氧系数KLa值相等放大优点 大罐的通风量要比小罐的小得多 * VS的意义 通风强度 通风搅拌的强弱 通风准数Na Q/nDi3的意义 物理意义：反应器中空气线速度与搅拌液体的线速度之比 表征通风与搅拌的相对强度 按体积溶氧系数KLa值相等放大优点 大罐的通风量要比小罐的小得多 * VS的意义 通风强度 通风搅拌的强弱 通风准数Na Q/nDi3的意义 物理意义：反应器中空气线速度与搅拌液体的线速度之比 表征通风与搅拌的相对强度 按体积溶氧系数KLa值相等放大优点 大罐的通风量要比小罐的小得多 * * * ring-sparger及micro-sparger的区别及对Kla的影响 * 实测数据 气路影响：排他性气路与独立气路的区别及影响 第二个重要放大工艺参数：搅拌（转数与剪切力），搅拌的意义。 * P/V等值放大策略的缘由及放大公式 * 剪切力敏感型使用 * 耗氧限制型选用 * 放大过程中剪切力变大的不利影响 逐级放大的必要 * * 欧洲发酵工业协会统计的放大策略使用比例 * 各种不同放大策略带来的好处与劣处 mention cell culture challenging, risk reduced when following proven design * Kla行业经验数值（OTR与OUR的关系） * PBR launch * 工艺放大基础参数的获得的关键点及相关PAT设备 * scale-up与scale-down的关系，放大后参数的变化趋势 * 褪色法测定混合时间 不同器型混合时间及相应剪切力的关系 工艺放大的多尺度复杂性 * 单位体积发酵液的搅拌循环流量F/V，表征了反应器中醪液混合的均匀程度 * * Process Optimization and Scale up Section I 细胞培养工艺优化与放大 I _ _ _ 赵伟, 产品应用专家, 185-8882-8306 wei.zhao@ 实验室规模 摇瓶， 转瓶， 1-20L反应器 中试规模 50L, 200L, 生产规模 5000L, 40000L 工艺放大目的 使小型发酵试验所获得的规律和数据能在大生产中再现 目录 培养工艺放大策略 工艺放大策略应用 “混合和传质” 液质混合/ 剪切力? 搅拌 传氧 / CO2 去除 ? 通气 培养工艺放大核心 经验与工程参数在放大中起到同样重要的作用 实现放大后的质量传递、动量传递、热量传递效率一致 比拟放大的依据 几何相似 通风量放大 搅拌功率放大 混合时间相同 放大的基础几何相似 机械搅拌反应器，若放大时几何相似，则可用搅拌器直径之比Di2/Di1代替反应器直径之比 Vessel UniVessel 2L BIOSTAT STR 50L BIOSTAT STR 200L BIOSTAT STR 2000L max. working volume [L] 2 50 200 2000 vessel diameter d1 [mm] 130 370 585 1295 ratio h/dv 1,8 1.8 1.8 1.8 impeller diameter 3-blade di2 [mm] 54 143 225 492 ratio di/dv 3-blade 0,42 0.39 0.38 0.38 Distance between impellers tbd 186 300 492 Ratio HL/d1 1.5 1.27 1.34 1.29 按照反应器的各个部件几何尺寸比例放大。放大倍数即为反应器的增加倍数 理想反应器放大应达到的相似条件： 1、几何相似性 2、流体力学相似性 3、热力学相似性 4、质量（浓度）相似性 5、生物化学相似性 一、气体流量的放大 单位培养液体积中气体流量Q /V相同 反应器空截面的空气线速度Vs相同 体积溶氧系数KLa值相同 P