园林植物报春花的组织培养.docVIP

园林植物报春花的组织培养 　　摘 要：本试验以报春花叶片、茎段作为外植体，进行了初代组织培养，并进行增殖、生根培养。结果表明：75%的酒精（0.5 min）+0.1%升汞（8 min）具有很好的消毒作用;MS +6-BA 1.0 mg?L-1+NAA 0.2 mg?L-1是不定芽分化的最佳培养基配比;MS+6-BA 1.0 mg?L-1 +NAA 0.2 mg?L-1是不定芽增殖的最佳培养基配比;1/2MS+NAA 0.2 mg?L-1是生根的最佳培养基配比。 　　关键词：报春花;外植体;培养基 　　中图分类号：S688 文献标识码：A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2015.11.036 　　Tissue Culture of Primula malacoides Franch. 　　HU Wan-yin 　　（Tree Breeding Research Center of Shanxi Province，Taiyuan， Shanxi 030006 ， China） 　　Abstract： In this experiment， leaves and stems of Primula malacoides Franch. were taken as explants， and conducted the primary tissue culture， and proliferation， rooting culture. The results showed that 75% alcohol （0.5 min） 0.1% mercuric chloride （8 min） had good disinfection effect; the best medium ratio for the differentiation of adventitious buds was MS +6-BA 1.0 mg?L-1 +NAA 0.2 mg?L-1; for adventitious bud proliferation， the optimum culture medium composition was MS+6-BA 1.0 mg?L-1 +NAA 0.2 mg?L-1; 1/2MS+NAA 0.2 mg?L-1 was the best rooting culture medium composition. 　　Key words： Primula malacoides Franch.; explants; callus culture medium 　　报春花 （Primula malacoides Franch.）又名小种樱草、七重楼，报春花科报春花属，叶片长卵形或圆形，叶缘有齿，叶柄长5 cm左右。花葶高20～30 cm，花冠高脚碟状。多生长于荒野、田边，原产于中国的云南、贵州，各地栽培，颇具观赏性。 　　报春花原产中国，草本植物。喜气候温凉、湿润的环境和排水良好、富含腐殖质的土壤，不耐高温和强烈的直射阳光，多数亦不耐严寒。叶基生，全株被白色绒毛。花通常2型，排成伞形花序或头状花序。花期为12月至次年4月，早春开花为本属植物的重要特性，其中文名报春和学名均含有早花的意思。近年来发展很快，已成为当前一类重要的园林花卉。 　　组织培养又叫离体培养，通常指从植物体中分离出符合需求的组织（器官、细胞、原生质体等），在人工无菌操作条件下，进行培养从而获得再生的完整植株，或者生产出具有经济价值的其他产品的技术。本试验以报春花叶片、茎段为外植体，进行了初代组织培养，并进行增殖、生根培养，在建立报春花组织培养无菌体系的基础上，对比了外植体不同灭菌方法对灭菌效果的影响，以及不同激素浓度对报春花叶片、茎段芽分化、不定芽增殖及其生根的影响。 　　1 材料和方法 　　1.1 试验材料 　　使用材料取自盆栽报春花的叶片和茎段。 　　1.2 试验材料的处理 　　组织培养前，先从室内培养的盆栽植株上取生长旺盛的报春花叶片和嫩茎作外植体，取材后放入烧杯里，用大量的水洗去表面附着物后，再放到自来水管下进行二次冲洗（时间约60 min），然后放入到瓶中，在超净工作台上再迅速用无菌蒸馏水冲洗3遍后等分为2份。每种消毒剂处理15瓶，每瓶接种4块，处理方法见表1。最后，用无菌蒸馏水冲洗6次。将叶片横切和纵切后切成1 cm×1 cm大小，将嫩茎切成1 cm左右的茎段作外植体用。 　　 　　1.3 培养基配比 　　基本培养基为MS，琼脂为6 g，蔗糖浓度为3%，pH 值为5.8。初代培养基为：（1）MS+6-BA 0.5 mg?L-1+NAA 0.1 mg?L-1;（2）MS+