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复合酶法提取金针菇总黄酮的优化 　　摘要：为了研究采用复合酶法从金针菇[Flammulina velutiper （Fr.） Sing]中提取总黄酮的最适条件，通过单因素试验和正交试验探讨了料液比、酶反应时间、酶反应温度、酶反应pH对金针菇总黄酮提取率的影响，并以金针菇总黄酮提取率为评价指标，优化提取工艺。结果表明，复合酶法提取金针菇总黄酮的最适条件为料液比1∶20（g∶mL），酶反应时间80 min，酶反应温度60 ℃，酶反应pH 5，在此条件下金针菇总黄酮的提取率为4.76%。 　　关键词：复合酶法；金针菇[Flammulina velutiper （Fr.） Sing]；总黄酮；提取 　　中图分类号：S646.1+5；R284.2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）14-3482-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.14.038 　　Optimization of Complex Enzymatic Extraction of Flavone From 　　Flammulina velutiper （Fr.） Sing 　　WANG Guang-hui，WEI Ya-dong，YU De-han 　　（Department of Pharmacy Chenical Engineering， Suihua University， Suihua 152061， Heilongjiang， China） 　　Abstract： In this paper， the optimal conditions of complex enzymatic extraction of flavone from Flammulina velutiper （Fr.） Sing were studied. Through the single factor and orthogonal experiments， the influences of solid-liquid ratio， enzymatic reaction time， enzymatic reaction temperature and enzymatic reaction pH on the extraction rate of flavone were discussed， and the extraction process was optimized. The experimental results showed that the optimum conditions were as follows： the solid-liquid ratio of 1：20（g/mL）， enzymatic reaction time of 80 min， enzymatic reaction temperature of 60 ℃ ， enzymatic reaction pH of 5. Under this condition， flavone extraction rate was 4.76%. 　　Key words： complex enzyme； Flammulina velutiper （Fr.） Sing； total flavone； extraction 　　金针菇[Flammulina velutiper （Fr.） Sing]学名毛柄金钱菌，属担子菌纲伞菌目白蘑科金钱菌属。现代药理研究表明，金针菇含有多种有效药用成分，尤其是黄酮类化合物具有消炎、抗氧化、抗肿瘤、降血压、保护心脑血管系统等多种生物活性[1-5]。因此，金针菇总黄酮具有广阔的开发前景，建立高效经济的金针菇总黄酮提取方法具有重要的现实意义。本研究采用复合酶法提取金针菇总黄酮，并通过单因素试验和正交试验对金针菇总黄酮的提取工艺进行了优化，以期为合理开发金针菇总黄酮资源开辟一条新的途径。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与试剂 　　金针菇，绥化学院食用菌研究所提供；无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、磷酸氢二钠、柠檬酸等均为国产分析纯试剂。木瓜蛋白酶（10 000 U/g）和纤维素蛋白酶（10 000 U/g）购于上海信帆生物科技有限公司。 　　1.2 主要仪器 　　DK-98-ⅡA型电热恒温水浴锅、FW100型高速万能粉碎机：天津市泰斯特仪器有限公司；TDL-60B-B型台式低速离心机：湖南星科科学仪器有限公司；752型紫外可见分光光度计：上海菁华科技仪器有限公司；JY501型电子分析天平：上海衡平仪器仪表厂。 　　1.3 试验方法 　　1.3.1 标准曲线的绘制 精确称取在