用高效液相色谱法测定舒肝丸中芍药苷含量.docVIP

用高效液相色谱法测定舒肝丸中芍药苷含量 摘 要：目的 建立舒肝丸中芍药苷含量测定方法。方法 采用C18柱，以甲醇：水（25：75）为流动相，检测波长为243nm。结果 线性范围为0.20～1.00ug，本法回收率为99.88%，RSD为1.41%。结论 本法操作简便易行，可供舒肝丸中芍药苷质量控制用。 关键词：舒肝丸 芍药苷 高效液相色谱法 Determination of Paeoniflorin in Shu-gan Pill by HPLC Li Zhiqian Sun Dapeng （Harbin Pharmaceutical Group institute，Harbin 150056，China） [Abstract] Objective： To establish the determination method of paeoniflorin in Shu-gan Pill. Methods： The C18 column was used，the mobile phase was methanol-water（25：75），the detection wave- length was at 243 nm. Results： The linear range of paeoniflorin was 0.20-1.00μg. The average recovery of paeoniflorin was 99.88% with RSD 1.41%. Conclusion： The method is simple and convenience and can be used for paeoniflorin quality control in Shu-gan Pill. [Keywords] Shu-gan Pill； paeoniflorin； HPLC 舒肝丸由白芍、川楝子、延胡索、沉香等数味中药制成，具有舒肝和胃，理气止痛的功效，用于肝郁气滞，胸胁胀满，胃脘疼痛，嘈杂呕吐，嗳气泛酸。方中白芍[1]具有养血敛阴、柔肝止痛功效，文献报道白芍中芍药苷[2]具有抗炎镇痛之功，为方中主要有效成分之一，为了更好地控制产品的内在质量，保证临床用药的安全有效，本文采用高效液相色谱法测定制剂中芍药苷的含量[3～5]，并进行了方法学考察，作为舒肝丸质量控制的一个方面进行研究。 1仪器与试药 仪器：HP-1100高效液相色谱仪，WDL-95色谱工作站；KQ-250型超声波仪；试药：舒肝丸（哈药集团制药六厂提供）；甲醇为色谱纯，水为双蒸水；芍药苷对照品：中国药品生物制品检定所提供。 2实验方法 2.1色谱条件 色谱柱：Hypersil？?RBDS C18（4.6mm×150mm）柱，流动相： 甲醇-水（25：75），柱温为室温，检测波长：243nm；流速：1.0ml/min，进样量：10ul。 2.2线性范围 精密称取芍药苷对照品10mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；1，2，3，4，5ml分别置10ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取10μl注入高效液相色谱仪，测定峰面积，绘制标准曲线，表明芍药苷在0.20～1.00μg范围内呈良好线性关系，其回归方程为：A 53.190+68083.129c（r 0.9999）。 2.3精密度试验 精密量取对照品溶液2ul，重复进样五次，分别测得峰面积，RSD为1.32%（n 5）。 2.4稳定性试验 取同一份供试品溶液分别于1h，2h，12h，24h，36h进样10ul，测得峰面积，RSD为2.93%（n 5），其在36小时内基本稳定。 2.5重复性试验 取同一批样品5份，各2g，精密称定，并按样品测定方法测定，RSD为2.24%（n 5）。 2.6回收率实验 精密称取已知含量的同一批样品0.1g，分别精密加入芍药苷对照品溶液0.24mg，按样品测定方法测定，平均回收率为99.88%，RSD为1.41%（n 5）。结果见表1。 表1 回收率测定结果 3测定方法与结果 3.1测定方法 取舒肝丸粉末2g，精密称定，置50 m1锥形瓶中，加50%乙醇25m1，密塞，摇匀，称定重量，超声溶解，取出，放冷，称重，用50%乙醇溶液补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。分别精密吸取芍药苷对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得，色谱图（见图1（A），图1（B））。 （A）对照品溶液 （B）供试品溶液 （C）空白样品溶液 图1 舒肝丸中芍药苷测定HPLC色谱图 3.2干扰性试验 按处方比例，配制不含白芍的空白样品溶液，按测定方法测定，在与芍药苷对照品相同保留时间处未显示明显色谱峰，认为无干扰，见图1（C）。 3.3样品测定结果