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液相色谱紫外―可见光检测器与光电二极管阵列检测器在饮料中合成着色剂测定中应用对比.doc
液相色谱紫外―可见光检测器与光电二极管阵列检测器在饮料中合成着色剂测定中应用对比
【摘 要】本文综述高效液相色谱中普通紫外-可见光检测器与光电二极管阵列检测器的结构原理,通过实验人工合成色素的测定,同时用两种检测器串联,通过光谱吸收图分析对比的方法,发挥日常检测中定性的应用。
【关键词】高效液相色谱普通紫外-可见光检测器;光电二极管阵列检测器;方法
【Abstract】Structure and principle of visible light detector and photoelectric diode array detector common purple review in high performance liquid chromatography -, through experimental determination of artificial synthetic pigment, at the same time with two detector connected in series, the absorption spectrumchart analytic method, application of play of the routine detection.
【Key words】High performance liquid chromatography withultraviolet visible detector;Photodiode array detector;Method
高效液相色谱仪已经是一种应用范围极广泛的分析仪器,尤其对于食品中常用添加剂的检测,更具有举足轻重的地位。液相色谱应用最广泛的检测器是紫外-可见光检测器(UV-VIS),又称紫外可见吸收检测器、紫外吸收检测器(UV)、紫外光度检测器、或直接称紫外检测器。几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度,而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感,因此既可用于等度洗脱,也可用于梯度洗脱。其原理基于Lambert-Beer定律,即被测组分对紫外光或可见光具有吸收,且吸收强度与组分浓度成正比。很多有机分子都具紫外或可见光吸收基团,有较强的紫外或可见光吸收能力,因此紫外检测器既有较高的灵敏度,也有很广泛的应用范围。[1]
然而用普通的紫外可见光检测器检测时,只能选择一个波长对样品进行分析,且对于色谱峰还无法进行定性分析。鉴于此光电二极管阵列检测器逐渐发展起来了,并得到了广泛应用。以光电二极管阵列(或CCD阵列,硅靶摄像管等)作为检测元件的紫外可见光检测器。它可构成多通道并行工作,同时检测由光栅分光,再入射到阵列式接受器上的全部波长的信号,然后,对二极管阵列快速扫描采集数据,得到的是时间、光强度和波长的三维谱图。与普通紫外检测器不同的是,普通紫外检测器是先用单色器分光,只让特定波长的光进入流动池。而光电二极管阵列检测器是先让所有波长的光都通过流动池,然后通过一系列分光技术,使所有波长的光在接受器上被检,也就是可以快速扫描被测组分的紫外-可见吸收光谱。使我们可以得知样品溶液在波长段190nm-800nm之间的任意波长的吸收值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 样品和试剂
被测样品为果汁饮料,甲醇(HPLC),氨水、乙醇、柠檬酸、乙酸胺均为分析纯,柠檬黄(0.5mg/mL) 苋菜红(0.5mg/mL)胭脂红(0.5mg/mL)日落黄(0.5mg/mL)亮蓝(0.5mg/mL)(购自中国计量科学院)诱惑红为固体(纯度为80%),分析用水为超纯水
1.1.2 仪器和设备
LC-2010AHT 高效液相色谱仪带自动进样器(日本岛津),UV-VIS 与SPD-M20A二级管阵列检测器(日本岛津)串联。0 45 m 孔径滤膜; 2 mL 一次性注射器
1.2 方法
1.2.1 标准溶液配制
标准储备液:准确称取诱惑红标准品0.0625g,溶解后移入50 mL 容量瓶中,超纯水定容至 50 mL,标准物质溶液浓度均为1.0 mg/ml
标准使用液配制:准确吸取柠檬黄 苋菜红 胭脂红 日落黄 亮蓝标准储备液各 5.00 mL,诱惑红2.00mL
定容至 50 mL,稀释成浓度为0.05 mg/mL(诱惑红0.04mL) 的混合标准液
1.2.2 仪器分析方法
液体样品按照国标方法[2-3]处理后,提取液经0 45 m孔径滤膜过滤待分析流动相为甲醇+0 02 mol/L 乙酸铵,比例为按照国标方法[2];色谱柱为ECOSIL C18柱(4.6 mm *150 mm, 5um);检
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