高效液相色谱―荧光检测法测定水产品中孔雀石绿残留量.docVIP

高效液相色谱―荧光检测法测定水产品中孔雀石绿残留量 　　摘要 将水产品样品中残留的孔雀石绿用硼氢化钾还原为其代谢产物隐色孔雀石绿，经前处理试剂盒提取，固相萃取柱净化、反向色谱柱分离，用液相色谱仪荧光检测器检测。方法的回收率在84.5%～92.1%，相对标准偏差4.09%～5.26%，检出限为0.5 μg/kg。结果表明：该方法检测孔雀石绿前处理过程简单，灵敏度高，能快速对大量样品进行定量分析。 　　关键词 水产品；孔雀石绿；残留量；高效液相色谱-荧光检测法；测定 　　中图分类号 TS207.3；O657.7+2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）15-0306-01 　　Determination of Malachite Green Residues in Fishery Products by High Performance Liquid Chromatography with Fluorescence Detector 　　GAO Yue-ming ZHU Jie-wen CHEN Yu-ru 　　（Supervision and Testing Center for Quality and Safety of Agri-products of Chancheng District of Foshan City in 　　Guangdong Province，Foshan Guangdong 528000） 　　Abstract The residual malachite green（MG）in fishery products was reduced to leuco-malachite green（LMG）with KBH4，samples were extracted by LMG′s pre-treatment kit，and purified by solid-phase extraction cartridges.The LMG was determined by high performance liquid chromatography.The recoveries of the method was 84.5%～92.1%，the relative standard deviation（RSD）values for repeatability was 4.09%～5.26%，the detection limit was 0.5 μg/kg.Thus，this is an accurate method which has simple pretreatment，and it is applicable for quickly and accurate determination of large number of samples. 　　Key words fishery product；malachite green；residues；HPLC fluorescence detection；detection 　　孔雀石绿是三苯甲烷类化学物，作为抗真菌剂和消毒剂曾被广泛用于水产养殖业，因孔雀石绿及其代谢产物具有致癌性，包括我国在内的许多国家禁止在水产养殖业中使用[1]。由于没有低廉有效的替代品，孔雀石绿在水产养殖中的使用屡禁不止，因而加强对其监控尤为重要。 　　孔雀石绿在水生动物体内迅速代谢成无色孔雀石绿，而无色孔雀石绿的毒性超过孔雀石绿，所以通常将孔雀石绿和无色孔雀石绿的总量作为动物源性食品中孔雀石绿残留的限量指标。孔雀石绿的检测方法主要有高效液相色谱法、液相色谱质谱联用法等。液相色谱质谱联用法检测灵敏度高，但仪器及检测试剂的成本较高。高效液相色谱法检测成本相对较低，按国家标准（GB/T20361-2006）检测，检测限可达0.5 μg/kg[2]，但此检测方法前处理复杂繁锁、耗时，溶液转移的次数多，容易造成损失，使回收率不稳定。现结合孔雀石绿检测前处理试剂盒进行孔雀石绿残留量的检测，方法简单、快速、灵敏、准确，能快速对大量样品进行定量分析，方法等价于国家标准（GB/T20361-2006）。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　高效液相色谱仪（Agilent 1200型）配荧光检测器，漩涡振荡器（德国IKAms3型），多位振荡器（德国Heidolph Multi Reax型），固相萃取仪（美国Supelco 24型），高速冷冻离心机（德国Eppendorf 5804R）。孔雀石绿标准品（德国Dr.Ehrenstorfer公司），孔雀石绿快速检测前处理试剂盒（液相色谱法，广州恩康生物科技有限公司），Agilent PRS固相萃