高效液相色谱法测定化妆品中烟酸、烟酰胺含量.docVIP

高效液相色谱法测定化妆品中烟酸、烟酰胺含量 　　摘 要：采用高效液相色谱仪同时测定化妆品中烟酸、烟酰胺的含量。样品经甲醇：去离子水（3：7） 溶液萃取，HPLC测定，外标法定量。加标回收率在95.5%～102%之间，相对标准偏差为1.11%～3.71%。本方法具有良好的灵敏度和重现性，可以满足化妆品中烟酸、烟酰胺检测的要求。 　　关键词：高效液相色谱仪 烟酸 烟酰胺 化妆品 　　中图分类号：TQ658 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2014）02（a）-0138-02 　　烟酸也称作维生素B3，或维生素PP，分子式：C6H5NO2，耐热，能升华。烟酸又名尼克酸、抗癞皮病因子。在人体内还包括其衍生物烟酰胺或尼克酰胺。它是人体必需的13种维生素之一，是一种水溶性维生素，属于维生素B族。烟酸在人体内转化为烟酰胺，烟酰胺是辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的组成部分，参与体内脂质代谢，组织呼吸的氧化过程和糖类无氧分解的过程。烟酸和烟酰胺都微溶于水，性质稳定，不易被酸、碱及高温环境所破坏。维生素B3广泛存于动植物组织中。 　　烟酸有较强的扩张周围血管作用，临床用于治疗头痛、偏头痛、耳鸣、内耳眩晕症等。烟酸为维生素类药物，与烟酰胺统称维生素PP，用于抗糙皮病，亦可用作血扩张药，大量用作食品饲料的添加剂。作为医药中间体，用于异烟肼、烟酰胺、尼可刹及烟酸肌醇酯等的生产。 　　若其缺乏时，可产生糙皮病，表现为皮炎、舌炎、口咽、腹泻及烦躁、失眠感觉异常等症状。烟酸是少数存在于食物中相对稳定的维生素，即使经烹调及储存亦不会大量流失而影响其效力。烟酸、烟酰胺效用：促进消化系统的健康，减轻胃肠障碍；使皮肤更健康；预防和缓解严重的偏头痛；促进血液循环，使血压下降；减轻腹泻现象。最受瞩目的功效是抑制黑色素转移，也就是美白的效果，被称为护肤品的黄金10大成分之一。此外，对油性痘性肌肤的改善、肌肤炎症的舒缓、肤质的改善等，都有相当的学术文献支持。更重要的是烟酸、烟酰胺安全性佳，对皮肤无刺激性，所以广用在各种保养品中。由于烟酸、烟酰胺广泛用于化妆品尤其是保养品中，但是当前针对化妆品中烟酸、烟酰胺含量检测的标准或者文献比较少，因此建立一个系统，方便具有良好的灵敏度和重现性的检测方法非常有必要。 　　1 实验部分 　　1.1 仪器和试剂 　　Agilent 1200高效液相色谱仪附带二极管阵列检测器（DAD）；色谱柱：ZORBBAX Extend-C18高效液相色谱柱（Analytical 4.6×150 mm 5-Micron，美国Agilent 公司）或性能相当者；圆周震荡仪；0.22 m微孔滤膜；玻璃器皿（所用玻璃器皿洗净后，用去离子水冲洗，烘干备用）。烟酸、烟酰胺采用AccuStandard品牌固体标准样品，规格：1 g/支。甲醇（色谱纯）、去离子水、异丙醇（色谱纯）、庚烷磺酸钠、冰乙酸、盐酸。 　　1.2 标准溶液的配制 　　分别准确称取0.1 g（精确到0.0001 g）烟酸、烟酰胺固体标准品于100 ml容量瓶中用甲醇?去离子水（3?7）溶液定容配制成1000 mg/L标准储备液；然后准确量取2 ml标准储备液于50 ml容量瓶中用甲醇?去离子水（3∶7）溶液定容配制成40 mg/L中间液，临用前配制。分别准确量取烟酸、烟酰胺混合标准中间液0.0 ml、1.0 ml、2.0 ml、5.0 ml、10.0 ml至50 ml容量瓶中用甲醇：去离子水（3∶7）溶液定容，配制成0.00 mg/L、0.80 mg/L、1.60 mg/L、4.00 mg/L、8.00 mg/L标准系列工作液。 　　1.3 样品的制备提取 　　准确称取化妆品试样5.0 g，加入甲醇?去离子水（3∶7）溶液25.0 ml，于圆周震荡仪上震荡1 min，再置于超声清洗机中超声30 min，然后加入甲醇?去离子水（3∶7）溶液定容至50 ml，最后取上清液用0.22m微孔滤膜过滤后用HPLC上机分析。空白试验：实验中所使用的试剂按上述方法处理后，进行HPLC分析。 　　1.4 测定 　　1.4.1 参考色谱条件 　　色谱柱：ZORBBAX Extend-C18高效液相色谱柱（Analytical4.6×150mm5-Micron，美国Agilent 公司）或性能相当色谱柱。 　　流动相：异丙醇20 ml，庚烷磺酸钠1.0 g，用去离子水溶解定容至1L，然后先用冰乙酸调pH值至3.0，再用0.1 mol/L盐酸调pH值至2.1。上机操作采用甲醇为有机相，有机相和缓冲液比例为8∶92。 　　流速：1 ml/min； 　　检测波长：261 nm； 　　柱温：35 ℃； 　　进样量：10L。 　　2 结果与讨论 　　2.1 检测波长的确定