3微生物代谢调节.pptVIP

在生长期间加入一种能诱导酶的化合物—异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG），作图会显示出两条直线，分别代表有和没有诱导物的合成速率。 图3-4显示一种安慰诱导物对大肠杆菌β-半乳糖苷酶的诱导作用。 试验是在最低盐分-麦芽糖培养基中进行。过程添加的ITPG最终浓度为10-4mol/L。有诱导物IPTG时，β-半乳糖苷酶的比活为104U/mg Pr；无诱导物时为10U/mg Pr（图中虚线）—将培养物过滤后重新培养在不含IPTG的培养基中的结果。 安慰诱导物： β-半乳糖苷酶能水解乳糖成葡萄糖和半乳糖。有些诱导物不被代谢，被称为安慰诱导物（gratuitors），如异丙基硫-β-半乳糖苷，IPTG。 诱导系数： 酶合成的诱导速率与非诱导速率之比称为诱导系数。ITPG的诱导系数为1000。 指培养基中某种基质的存在会减少（阻遏）细胞中相应酶的合成速率。 阻遏物（repressor）在分解代谢中是操纵子调节基因（R）编码的阻遏蛋白，能可逆地同操纵基因（O）结合，从而控制其相邻的结构基因（S）的转录。 3.1.2.2 分解代谢物阻遏 能被快速利用的基质，如葡萄糖，其分解代谢物会阻遏另一种异化较难利用基质的酶的合成。 图3-5为大肠杆菌K12中精氨酸对鸟氨酸氨甲酰基转移酶合成的阻遏作用。后者参与精氨酸的生物合成。精氨酸加入到培养物中，其合成速率很快受到阻遏；精氨酸去除，阻遏作用很快被解除（derepression）。 阻遏率：合成的阻遏速率与去阻遏速率之比称为阻遏率。 试验在最低盐分-麦芽糖培养基中进行。。添加精氨酸时，鸟氨酸氨甲酰基转移酶的比活为1.5U/mg Pr-图中实线；除去精氨酸的后比活为1200U/ mg Pr-图中虚线，是将培养物过滤后重新培养在不含精氨酸的培养基中的结果。 AA，嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成的控制以反馈调节方式进行。 其生理意义在于避免物流的浪费和不需要酶的合成。 反馈抑制一般针对紧接代谢途径支点后的酶；而阻遏往往影响从支点到终点的酶。 3.1.2.3 反馈调节 操纵子编码的阻遏Pr无活性，需与辅阻遏物（co-repressor，即终产物或其衍生物）结合才能阻止编码合成途径中的第一个酶的基因转录。 图3-6为简单支路途径的调节方式。 （1）反馈阻遏 肠道细菌可能具有两种同功酶催化A→B的反应，其一由E控制；其二由G控制。酶2的阻遏通常属于协同作用。 顺序反馈抑制，首先在枯草杆菌芳香氨基酸系统中发现。如图3-6所示，E抑制酶3和G抑制酶5，从而积累C，C再抑制酶1。 反馈抑制的补偿拮抗作用可举大肠杆菌氨甲酰磷酸合酶的例子。其产物，氨甲酰磷酸用于Arg和嘧啶的合成。其合酶受UMP抑制，此抑制作用受鸟氨酸拮抗，后者可以与氨甲酰磷酸反应产生瓜氨酸。图3-6中的H拮抗G对酶1的抑制作用。 图3-7a.为枯草杆菌和地衣杆菌的分支酸形成途径调节方式。 枯草杆菌具有两种明显不同的莽草酸激酶(s)和两个分支酸变位酶(c) ；地衣杆菌有两个s酶，一个c酶。枯草杆菌的s同功酶之一像酶p（磷酸-2-酮-3-脱氧景天庚酮糖酸醛缩酶）那样受分支酸或预苯酸的抑制；地衣杆菌的s酶只受分支酸的抑制。枯草杆菌中p、s和c的活性受酪氨酸的阻遏；而地衣杆菌中的酶s是组成型的，酪氨酸阻遏p和c的活性。 不同细菌属的酶p受阻遏方式不同。芽孢杆菌属中的顺序反馈抑制作用也存在于链球菌中。链霉菌中色氨酸是惟一的抑制剂。假单孢菌属中酪氨酸是主要抑制剂。要最大限度地抑制需苯丙酮酸(苯丙氨酸的直接前体)和酪氨酸的联合作用，色氨酸只产生部分抑制作用。酪氨酸和色氨酸的抑制作用可被PEP克服；而苯丙酮酸的抑制作用则被D-赤藓糖-4-磷酸所克服。即如途径起始材料不足，产率受终产物反馈抑制的影响特别显著。 图3-7b为枯草杆菌和绿脓杆菌的色氨酸合成末端途径的调节。 枯草杆菌与肠道杆菌调节方式相似，第一个酶，邻氨基苯甲酸合酶a受色氨酸抑制。a和其他酶还受色氨酸的反馈阻遏。 对假单孢菌，a受色氨酸阻遏，但酶合成的调节方式不同：a，o（邻氨基苯甲酸核糖基转移酶）和I（吲哚甘油磷酸合酶）受色氨酸阻遏，r（磷酸核糖基-邻氨基苯甲酸异构酶）是组成型。其色氨酸合酶复合物t受其基质茚哚甘油磷酸的诱导。这些酶合成控制的差异也反映在相应基因的定位上。在枯草杆菌中这些基因如同在肠道杆菌那样形成一簇，而在绿脓杆菌