实验二--0食品防腐剂抑菌效果的测定讲解.pptVIP

实验二 食品防腐剂抑菌效果的测定 一、实验目的 了解山梨酸钾产生抑菌效果的原理 学会利用管碟法（牛津杯法）测定食品防腐剂的抑菌效果 了解不同浓度山梨酸钾对不同微生物抑菌活性的影响 二、实验原理 山梨酸钾是一种真菌抑制剂，防腐作用主要靠未解离的分子，在pH6.0以下对霉菌和酵母菌有明显的抑制作用，在pH6.5时无效。 牛津杯里的防腐剂向琼脂培养基扩散渗透，通过对试验菌的抑杀作用而影响细菌的生长繁殖，在牛津杯周围形成抑菌圈。依据抑菌圈的大小可以判断抑菌能力的强弱。 三、实验器材 （一）培养基及试剂 葡萄糖蛋白胨琼脂培养基 山梨酸钾溶液（0.20%、0.30%、0.40%、0.50%） （二）菌种 1、啤酒酵母 2、金黄色葡萄球菌 四、实验步骤 1、熔化培养基 2、制平板 将熔化培养基倒入平皿内约25mL（培养皿底约一半高度），待其凝固。 3、涂布平板接种 用移液枪吸取0.1mL菌液加到上述平板中，用无菌三角玻璃涂棒涂布均匀。 4、加牛津杯和药液： 标记药液浓度后，用无菌镊子将牛津杯等距离放置在培养基上，用移液枪在每个牛津杯中加入不同浓度的药液0.2mL。如下图： 5、正置培养： 细菌 37℃ 真菌 28℃ 6、结果判定： 根据牛津杯周围有无抑菌圈及其直径大小，来判断该菌对山梨酸钾的敏感程度。用直尺测量抑菌圈大小，并记录。 五、实验结果及分析 六、思考题 1、山梨酸钾抑菌的机理是什么？ 2、山梨酸钾在食品中主要抑制哪些微生物？ 3、用管碟法测定时，为什么不用玻璃皿盖而用陶瓦盖？ * * （三）其他 1、无菌陶瓦盖培养皿2套 2、无菌生理盐水1瓶 3、无菌牛津杯10个 （四）仪器 1、超净工作台 2、1mL移液枪 1：0.20% 2：0.30% 3：0.40% 4：0.50% 0：空白 注意：（1）牛津杯内加入药液后不要再移动 （2）不能在陶瓦盖上做记号 1 2 3 4 0 0.20 0.30 0.40 0.50 啤酒酵母 金黄色 葡萄球菌 山梨酸钾浓度（%） 抑菌圈直径 （mm×mm） 分析: *