四亚甲基二砜四胺半数致死量的测定讲解.pptVIP

四亚甲基二砜四胺半数致死量的测定 黄玲凤 徐震霖 叶春锋 杨金平 邹太辉 logo 2014年11月27日 目录 1.【实验目的】 3.【实验步骤】 2.【相关知识】 4.【注意事项】 -*- 【实验目的】 1.学习序贯法测定四亚甲基二砜四胺LD50的方法 2.观察四亚甲基二砜四胺中毒时的临床表现 3． 探究丙戊酸钠对四亚甲基二砜四胺的解救作用 -*- 【相关知识】 （1）四亚甲基二砜四胺（俗名毒鼠强，分子式：C4H8N4O4S2，分子量240.27） 化学性质:稳定，在255～26℃分解，但在持续沸水溶液中分解。受热分解有毒氧化氮、氧化硫气体。哺乳动物口服的LD50（最低致死剂量） 为0.10mg/kg。小鼠经口MLD为0.2mg/kg; 经皮下的MLD为0.1mg/kg。 物理性质：无味、无臭、有剧毒的粉状物。在水中溶解度约0.25mg/mL[1] ；微溶于丙酮；不溶于甲醇和乙醇。可经消化道及呼吸道吸收。不易经完整的皮肤吸收。它是一种磺胺衍生物，主要用途是杀鼠剂。 对各类动物及人的毒害极高，经常被用作人毒害人，由于性质稳定，不容易被分解，有二次中毒的可能。中国明令禁止生产，使用。 -*- （2）本品对中枢神经系统,尤其是脑干有兴奋作用,主要引起抽搐。本品对γ-氨基丁酸有拮抗作用,主要是由于阻断γ-氨基丁酸受体所致,此作用为可逆性的。 -*- （3）对于毒鼠强中毒，目前尚无特效的解救药，抽搐时应使用大剂量抗惊厥药物,包括安定、巴比妥类和抗癫痫药，丙戊酸钠就是常用的抗癫痫药，因为该药可增加中枢的 GABA ,从而剌激兴奋GABA 受体,此外尚提倡静注或静滴 γ -氨酪酸,每次 2 g ,每日 2 ～ 3次,直接增加血液和脑中GABA 含量，从而减缓四亚甲基二砜四胺的毒理作用。 -*- 【实验材料】 小鼠12只，体重计，电子天平，烧杯，试管，玻璃棒，称重计，四亚甲基二砜四胺0.5g，丙戊酸钠1.0g，生理盐水 -*- （1）取小鼠10只、编号、称重 按表所示剂量，从最大剂量逐一开始，计算每鼠喂食四亚甲基二砜四胺粉末1mg/10g，用电子天平称量，直接喂食，观察中毒症状并记录，同时观察注射后死亡时间t。第1只小时用药后tmin内发生死亡，死亡后则在相应的实验结果栏以“+”记录，下一只小鼠则降低一级剂量给药。如果小鼠在规定时间内没有死亡，在相应实验结果以“ - ”记录，下一只小鼠则用高一级剂量，直至10只小鼠全部做完。 -*- 注：S：各剂量组动物存活数 F：各剂量组动物死亡数 R：各剂量组实验动物总数 X：各组剂量的对数，即lgD 剂量（mg/kg） lgD(X) 实验结果 S F R X ?R 158 2.20 100 2.00 63 1.80 25 1.40 -*- （3）计算：将实验数据带入列序贯法公式，计算四亚甲基二砜四胺的LD50 LD50 =lg-1 （C/n）（mg/kg） C=ε（X.R）,n=实验动物数+1 （5）另取2只小鼠，称重，仔细观察和记录其正常活动、呼吸（频率、幅度、节律等是否均匀），瞳孔大小，唾液分泌、大小便，肌张力以及有无肌震颤等情况。 -*- （6）用喂食法将亚甲基二砜四按上述测定的LD50小鼠体内时，观察并及时记录小鼠的中毒症状。 （7）待中毒症状明显时，立即腹腔注射抗癫痫药丙戊酸钠，每次0. 2 g，观察老鼠的相关变化。记录 -*- 处理因素 有无惊叫 兴奋跳动 肌张力 肌震颤 给药前 给药后 注射丙戊 酸钠后 注：症状观察指标：①有无惊叫：用 “-”表示无，用“+”表示有， ②兴奋跳动：用 “-”表示无，用“+”表示有， ③肌张力： 用 “-”表示无下降，用“+”表示下降，用“++”表示明显下降 ④肌震颤： 用 “-”表示无，“+”表示局部肌震颤，用“++”全身肌震颤 -*- 【注意事项】 1.小鼠事先要做好空腹处理，以便其使用的药量与所称的药量相等 取小鼠的时候要注意随机分组 在用序贯法测半数致死量时，注意各组药物浓度千万不能搞错，给药剂量要准确 2.要事先做好抢救工作，中毒症状明显后立即抢救 3.另取两只小鼠称重后，观察重量是否相差过大，是则另换体型，体重相近的小鼠 . 4.注射丙戊酸钠，当腹腔注射不顺利时，可以采取尾部静脉注射或者灌胃法，一经采用某种方法，另一只小鼠均用该方法 -*- 【预期结果】 临床表现 动物