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高中新课标生物必修三知识点总结 专题一 基因工程（基本原理：基因重组） 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品又叫做DNA重组技术。把外源基因转入生物体内，能有效的打破物种界限，定向的改造生物的遗传性状。 1.1 DNA重组技术的基本工具 一、“分子手术刀” 1、名称：限制性核酸内切酶，又称限制酶。 2、来源：从原核生物中分离纯化的（真核生物也有）。 3、特点：识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列；并且有唯一切点（指每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键）。 4、识别序列大多数限制酶识别序列由6个核苷酸组成（ECORI、 SmaI）；也有少数酶的识别序列由4、5或8个核苷酸组成。 5、片段末端：两种形式——黏性末端和平末端。 二、“分子缝合针” 1、名称：DNA连接酶 2、来源：从大肠杆菌中分离得到的，为E.coliDNA连接酶。 从T4噬菌体中分离得到的，为T4DNA连接酶。 3、E.coli连接酶只连互补的黏性末端。T4DNA连接酶可连 黏性末端又可连平末端。 三、“分子运输车” 1、载体：质粒（在天然质粒的基础上经过人工改造的）、λ噬菌 体的衍生物、动植物病毒。 2、质粒：细菌细胞内独立于拟核DNA之外，裸露的、结构简单 并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 3、作为载体的条件： (1)能够在受体细胞内自我复制，或整合到染色体DNA上，随着 染色体DNA进行同步复制，并在宿主细胞内稳定保存。 (2)有一个到多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入其中。 (3)具有特殊标记基因，供重组DNA的鉴定和选择（四环素抗性 基因，氨芐青霉素抗性基因）。 DNA连接酶 DNA聚合酶 连接DNA 双链 单链 连接部位 在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键 将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的3’ 端的羟基上，形成磷酸二酯键 四、DNA连接酶与DNA聚合酶 1.2基因工程的基本操作程序 一、目的基因的获取 1、方法： (1)从自然界中已有的物种中提取出来。 (2)人工合成的基因：基因较小，核苷酸序列已知，通过DNA合 成仪或用化学方法直接人工合成。 (3)从基因文库中获取目的基因： ①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段导入受体菌的群体中储存，各个受菌分别含有这种生物的不同的基因。 ②部分基因文库（cDNA文库不含启动子）：只包含了一种生物的 一部分基因。 ③操作：根据目的基因有关信息（核苷酸序列，基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性）来获取。 ④特点：操作简便，但工作量大，具有一定的盲目性。 (4)利用ＰＣＲ技术（聚合酶链式反应）扩增目的基因： ①原理：ＤＮＡ双链复制的原理。 ②前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列，并根据这一序 列合成引物。 ③过程：a目的基因的DNA受热变性后解链为单链。 b引物与单链相应互补序列结合，在DNA聚合酶（Taq 酶）的作用下延伸。 c重复循环多次。 ④优点：可以在短时间内大量扩增目的基因（成指数形式扩增） （5）PCR技术与DNA复制比较 PCR技术 DNA复制 相同点 原理 DNA的复制 原料 四种游离的脱氧核苷酸（A，G，C，T） 条件 APT、模板、原料、酶 不同点 解旋方式 高温变性解旋 解旋酶解旋 场所 体外 主要在细胞核内 酶 热稳定性DNA聚合酶 （Taq酶） 细胞内含有的DNA 聚合酶 结果 在短时间内形成大的 DNA片段 形成整个DNA分子 二、基因表达载体的构建 1、基因表达载体的构建是实施基因工程第二步，也是基因工程的 核心。 2、使目的基因在受休细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。 3、表达载体组成：复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因 ①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。 ②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，使转录在需要的地 方停止下来。 ③标记基因：为了鉴别受体细胞中是否有目的基因，将含有目的 基因的细胞筛选出来(如抗生素抗性基因)。 ④复制原点：开始复制的地方。 三、将目的基因导入受体细胞 1、转化：