急性毒性实验内容讲解.ppt

急性毒性试验方法 一、急性毒性 急性毒性指人或动物一次或24 h之内多次接触外源化学物后，在短期内所发生的毒性效应，包括致死效应。 一次：指瞬间给实验动物染毒，如经口、经静脉注射染毒。 24 h之内多次：指外源化学物毒性过低，需给予动物较大剂量。 急性毒性效应出现的快慢和毒性反应的强度与外源化学物的性质和染毒剂量的大小有关。 如：丙烯腈，过氧化二碳酸二环己酯 急性毒性试验目的 了解外源化学物急性毒性的强度，求出LD50 了解外源化学物毒作用的性质、毒效应的特征及可能的靶器官，初步评价外源化学物的危险性。 探求外源化学物的剂量-反应（效应）关系，为亚慢性毒性、蓄积毒性和慢性毒性及特殊毒性试验染毒剂量的设计和观察指标的选择提供参考。 初步了解动物致死的原因，为研究毒作用的机制提供线索，进而为制定中毒急救治疗措施提供依据。 由急性毒性试验可得到两类毒性参数 上限参数 是以死亡为终点的毒性，包括绝对致死量、半数致死量、最小致死量、最大耐受量等； 下限参数 是以非致死性急性毒作用为终点的毒性，包括急性阈剂量和无作用剂量等。 用小动物试验可求出外源化学物对一种或几种实验动物的急性LD50或LC50; 用大动物试验可求出近似致死剂量（approximate lethal dose, ALD）; 根据LD50（LC50）值可进行急性毒性分级，以初步评价外源化学物对机体急性毒性大小和急性毒作用的强度。 急性毒性试验项目 急性半数致死量测定 半数耐受限量测定 7d喂养试验 其他：近似致死量试验、固定剂量法、急性毒性分级法、阶梯法、金字塔法、限量试验、急性系统毒性试验等。 急性毒性试验设计 实验动物选择 品种 品系 个体 性别 年龄 体重 生理病理状况 对外源化学物毒性反应与人近似； 易于饲养管理，方便实验操作； 易于获得，品系纯化，价格低廉。 实验动物的年龄与体重的关系 动 物　　 大鼠 小鼠 豚鼠 兔　 犬 猫 成年年龄（周） 3 2 2 3~4 3~4 3~4 体重（克） 150 15 250 1.5kg 7~15kg 1kg 寿命（年） 2~3 2~3 6~8 4~9 15~20 10~12 急性毒性试验的动物体重 大鼠 120～150ｇ 小鼠 18～22ｇ 豚鼠 200～250ｇ 家兔 2～2.5 kg 犬 10～15kg（成年） 变异范围不得超过所用动物平均体重的10％。 急性毒性试验的动物要求 动物数量：小动物4～6组，每组至少10只；犬等大动物每组6只。 性别：雌雄各半，也有例外，如，致畸试验的剂量准备，只作雌性动物LD50。 年龄：刚成年，未曾受孕、交配 实验动物的标记 染色法 耳缘孔口法 烙印法 挂牌法 染色法 用不同颜色的染料涂擦于动物不同部位来 表示不同号码，适用于大鼠、小鼠和豚鼠。 常用染料： 3％～5％苦味酸酒精饱和液，呈黄色； 甲基紫酒精饱和液，呈紫色； 0.5％中性红或品红溶液，呈红色等。 实验动物的标记 方法一： 按右前肢、右肋、右后肢、颈部、背中、尾根、左 前肢、左肋、左后肢，顺序编号为1～9号，不染色 为10号。在动物相同部位涂染另一种颜色染料表示 十位，两种颜色可编1～99号。 方法二： 以头部为1号，顺时针方向依次从右耳、右前肢、右 后肢、颈部、背中、尾根、左耳、左前肢、左后肢 染色，分别为2～10号。 染色法 优点： 简单方便，不痛苦，无损伤。 缺点： 时间较长时，染色剂易褪色； 标记容易模糊不清。 耳缘孔口法：　 在耳缘先用针穿孔和用剪刀剪口，再用酒精墨汁涂抹，使黑色渗入孔口，伤口愈合后不易脱落，这种标号亦可标号１～９９。 适用于大、小鼠。 烙印法： 将铸铁号码加热后，在动物体表部位烧烙，以破坏毛囊，留下印记。适用于大动物。 挂牌法： 用金属或塑料制成号牌，固定在动物的耳部或系于其颈部。适用于较大动物。 实验动物分组 目的：减少个体差异对实验结果的影响；原则：按统计学原则随机分组，使非