五味子配方颗粒制备工艺和质量标准研究.docVIP

五味子配方颗粒制备工艺和质量标准研究 摘 要：本实验以五味子醇甲为指标对五味子配方颗粒制备工艺进行研究。按照L9（34）正交设计表条件进行试验，得到最佳提取工艺为提取3次，第一次加入10倍量蒸馏水，提取1小时，第二次加入10倍量蒸馏水提取1小时，第三次加入10倍量蒸馏水提取1小时，浓缩，喷雾干燥。取干膏粉，加适量糊精和乙醇，采用槽型混合机混合，采用摇摆制粒机制粒，60摄氏度干燥，采用振动筛整粒。本工艺稳定、可行、收率高。 关键词：五味子配方颗粒；制备；工艺 五味子始载于《神农本草经》。古医书称它?K?x、玄及、会及，最早列于神农本草经上品中药，能滋补强壮之力，药用价值极高，有强身健体之效，与琼珍灵芝合用治疗失眠。五味子含有五味子素（schizandrin）、去氧五味子素（de-oxyschizandrin）、新一味子素（neoschizandrin）、五味子醇（schizan-drol）、五味子酯A、五味子酯B、五味子酯C、五味子酯D等。五味子具有保肝益肾、保护心脑血管、镇静、催眠等多种功能[1-5]。本实验以五味子醇甲为指标对五味子配方颗粒制备工艺进行研究。 1 仪器与试药 LC-310液相色谱系统（江苏天瑞仪器股份有限公司）；HQ-50高端试剂级超纯水机（郑州华新电气公司）；UV-1601可见分光光度计（北京北分瑞利分析仪器（集团）公司）；H26353万分之一电子天平（北京恒奥德仪器仪表有限公司）；RE-6000旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；YK30010数控超声波清洗器（常州越科进出口有限公司）。乙腈（上海甲美精细化工有限公司）；甲醇（上海展云化工有限公司）；氯仿（上海展云化工有限公司）；乙醇（上海甲美精细化工有限公司）。 2 方法与结果 2.1 单因素考察 2.1.1 提取次数 按处方称取药材，粉碎为20目，至于圆底烧瓶内，分别提取三次，第一次加12倍蒸馏水，煎煮1小时，过滤，合并滤液，减压浓缩；第二次加12倍蒸馏水，煎煮1小时，连续提取两次，过滤，合并滤液，减压浓缩；第三次加12倍蒸馏水，煎煮1小时，连续提取三次，过滤，合并滤液，减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中五味子醇甲含量并计算五味子醇甲收率。 2.1.2 药材粉碎目数 按处方称取药材，分别粉碎为10目、20目、40目，至于圆底烧瓶内，加12倍蒸馏水，煎煮1小时，连续煎煮三次，过滤，合并滤液，减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中五味子醇甲含量并计算五味子醇甲收率。 2.1.3 加水倍数 按处方称取药材，粉碎为20目，至于圆底烧瓶内，分别提取三次，第一次加10倍蒸馏水，煎煮1小时，连续三次，第二次加12倍蒸馏水，煎煮1小时，连续三次，第二次加14倍蒸馏水，煎煮1小时，连续三次，分别过滤，合并滤液，减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中五味子醇甲含量并计算五味子醇甲收率。 2.1.4 提取时间 按处方称取药材，粉碎为20目，至于圆底烧瓶内，分别提取三次，第一次加12倍蒸馏水，煎煮0.5小时，连续三次，第二次加12倍蒸馏水，煎煮1.0小时，连续三次，第二次加12倍蒸馏水，煎煮1.5小时，连续三次，分别过滤，合并滤液，减压浓缩。采用高效液相测定浓缩膏中五味子醇甲含量并计算五味子醇甲收率。 2.2 正交试验设计 实验结果表明，粉碎目数对五味子醇甲收率影响不大，提取次数、加水倍数和提取时间对五味子醇甲收率影响较大。选择提取次数、加水倍数和提取时间作为考察因素，采用正交试验法对影响提取效率的其它工艺条件进行优选。采用3个考察水平，用L9（34）正交表进行试验，因素水平表见表1。 2.3 五味子配方颗粒制备 取浓缩膏，喷雾干燥。取干膏粉，加适量糊精和乙醇，采用槽型混合机混合，采用摇摆制粒机制粒，60摄氏度干燥，采用振动筛整粒。 3 质量标准研究 3.1 色谱条件 色谱柱为Waters SunFire C18液相色谱柱（规格250×4.6mm，5um）；甲醇-水 13：7为流动相；检测波长为250nm；流速1.0mL?min-1。 3.2 供试品溶液的制备 取提取浓缩膏或五味子配方颗，精密称定，精密加水20ml，超声使溶解，放冷，置于分液漏斗中，用氯仿萃取5次，每次20毫升，合并有机相，蒸干，用10甲醇溶解，滤过，取续滤液，即得。 3.3 对照品溶液的制备 精密称取五味子醇甲对照品，用甲醇溶解稀释，配制成每1mL溶液中含五味子醇甲20μg的对照品溶液。 3.4 标准曲线的制备 将浓度为5μg/ml，10μg/ml，30μg/ml，50μg/ml，70μg/ml，80μg/ml，90μg/ml的对照品溶液分别吸取20μL注入HPLC，以进样量（μg）为横坐标，峰面积积分值A为纵坐标，绘制标准曲线。试验表明，五味子醇甲对照品在5～90μg/ml范围内线性关系良好。 3.5 回收率试验