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木棉花红色素提取工艺及分离纯化分析 　　摘要：以木棉（Bombax malabaricum）花为原料，采用蒸馏水、乙醇、3%柠檬酸为提取溶剂，大孔树脂吸附、乙醇洗脱分离纯化，研究木棉花红色素提取工艺及分离纯化。结果表明，用3%柠檬酸提取木棉花红色素效果较好，最佳提取工艺为料液比1∶20（g/mL），提取温度100 ℃，提取时间20 min；用大孔树脂X-5、D101、D4020静态吸附木棉花红色素效果较好，解吸溶剂适宜使用75%～95%乙醇；动态吸附后D4020大孔树脂分离富集色素的效果优于X-5、D101树脂；用大孔树脂吸附木棉花红色素，经解脱、浓缩、真空干燥后得到木棉花固体红色素。 　　关键词：木棉（Bombax malabaricum）花；红色素；提取；大孔树脂；分离纯化 　　中图分类号：TS264.4；Q949.757.4 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）11-2876-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.041 　　木棉（Bombax malabaricum）为木棉科、木棉属落叶大乔木，分布于广东、广西、云南、四川、海南、福建等省，其花为红色，花萼肉质，性味甘、淡、凉，具有清热利湿、解暑、解毒止血的功效[1]。木棉花已列入百花食谱，鲜花瓣或干花瓣可煎水服用或用于煮粥、煮汤。木棉花色素提取、木棉花干制品和花汁饮料的工艺研究虽有报道[2，3]，但对木棉花红色素的分离纯化研究较少，本试验对木棉花红色素提取、分离及纯化工艺进行研究，采用蒸馏水、乙醇、3%柠檬酸为提取溶剂，大孔树脂吸附、乙醇洗脱分离纯化，为木棉花的利用提供参考依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料、试剂及仪器 　　木棉自然落花采自广西农业职业技术学院院内。 　　柠檬酸、无水乙醇为分析纯。 　　VIS-7220型可见分光光度计（北京瑞利分析仪器公司），HH-S4型电热恒温水浴锅（江苏省金坛市医疗仪器厂）、DBS-100型电脑全自动部分收集器、HL-2B型恒流泵（上海沪西分析仪器厂有限公司）、层析柱（上海锦华层析设备厂）、DFZ型真空干燥箱（上海精宏实验设备有限公司）、2XZ-2型旋片真空泵（浙江黄岩求精真空泵厂）。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 色素提取 采取蒸馏水、乙醇为提取溶剂，提取木棉花红色素，测定其最大吸收波长。用3%柠檬酸在不同条件下（45、65 ℃）提取红色素，测定其最大吸收波长。 　　1.2.2 单因素试验 ①温度对红色素提取效果的影响。称取5.00 g木棉花，加40 mL 3%柠檬酸，料液比1∶8（g∶mL，下同），分别在45、65、85、100 ℃下水浴加热浸提20 min；②时间对红色素提取效果的影响。称取5.00 g木棉花，加40 mL 3%柠檬酸，料液比1∶8，100 ℃水浴加热浸提5、10、20、30、40 min；③称取13.33、8.00、5.00、4.00、2.00 g木棉花，加40 mL 3%柠檬酸（按料液比1∶3、1∶5、1∶8、1∶10、1∶20），100 ℃水浴加热浸提20 min。分别移取不同的提取液1.5、2.5、4.0、2.0 mL定容至10 mL，测定其吸光度。 　　1.2.3 色素静态吸附和洗脱 分别称取4.05 g S-8、D4020、D101、X-5、D296R 5种型号预处理过的树脂于5个烧杯中，加入木棉花红色素提取液10.00 mL，在室温下静置吸附60 min后测定上清液的吸光度（A510 nm、A520 nm）。 　　分别称取1.00 g已充分吸附红色素的5种型号树脂 S-8、D4020、D101、X-5、D296R，加入不同体积分数（95%、75%）的乙醇溶液10 mL，解吸20、60 min，取解吸60 min的溶液滴加2%柠檬酸调节pH为3～4，共6个处理，测定上清液的吸光度（A510 nm）。 　　1.2.4 色素柱层析分离的工艺流程 吸附树脂预处理→装柱→平衡→添加色素提取液→树脂吸附色素→用解吸溶剂洗脱色素→收集色素液[4，5]→测定OD510 nm。 　　2 结果与分析 　　2.1 木棉花红色素最大吸收波长 　　用蒸馏水、乙醇提取木棉花红色素，色泽分别为黄色、橙色；用3%柠檬酸提取，色泽为红色，效果较好。由图1、图2可见，木棉花红色素最大吸收波长为510～520 nm。蒸馏水提取、乙醇提取的最大吸收波长为520 nm，3%柠檬酸提取的最大吸收波长为510 nm。水提杂吸收峰较多，提取效果不明显。 　　2.2 单因素试验结果 　　2.2.1 温度对红色素提取效果的影响 如图3所示，随着温度的升高，提取的木棉花红色素含量增加，用3%柠檬酸提取无