枯草芽孢杆菌SD固体发酵白酒糟工艺研究.docVIP

枯草芽孢杆菌SD固体发酵白酒糟工艺研究 　　摘要 以白酒糟为主要原料，采用单因素试验研究了碳源、氮源、无机盐、初始pH值、接种量、菌龄、发酵时间等对纳豆芽孢杆菌SD固体发酵产芽孢数量的影响，并通过响应面法对发酵条件进行优化。试验结果表明，适宜的发酵培养基配方为白酒糟93%、豆饼粉7%、葡萄糖2.0%、KH2PO4 0.4%、MgSO4?7H2O 0.2%、MnSO4?H2O 0.05%、固水比1.0∶0.7；适宜的发酵条件为初始pH值7.28、接种量10.18%、种龄23.85 h、发酵时间84 h、培养温度35 ℃。在此发酵条件下，纳豆芽孢杆菌芽孢数量可达1.75×1010 cfu/g。 　　关键词 枯草芽孢杆菌；固体发酵；白酒糟；发酵条件；工艺优化 　　中图分类号 S816.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2015）19-0319-04 　　Abstract Effects of the solid-state fermentation conditions such as carbon sources，nitrogen sources，inorganic salt，initial pH value，inoculation，seed age and fermentation time were studied by using single-factor with Bacillus subtilis SD as tested strains.The fermentation conditions were optimized by using response surface experiment.The results showed that the optimal medium component were as follows：Distiller′s grain 93%，soybean cake powder 7%，glucose 2.0%，KH2PO4 0.4%，MgSO4?7H2O 0.2%，MnSO4?H2O 0.05%，the ratio of substance to water was 1.0∶0.7；The optimal fermentation conditions were initial pH value 7.28，inoculation 10.18%，seed age 23.85 h，cultural temperature 35 ℃，cultural time 84 h.Under these conditions，the live germ of Bacillus subtilis reached 1.75×1010 cfu/g. 　　Key words Bacillus subtilis；solid-state fermentation；distiller′s grain；fermentation conditions；process optimization 　　白酒糟是白酒生产的主要副产物。由于白酒酿制的主要原料是稻谷、高粱、红薯、玉米等，其中含有许多未能完全利用的蛋白质、氨基酸、维生素、各种微量元素以及丰富的发酵副产物等营养物质[1]。我国是一个白酒生产大国，据统计，我国年产白酒糟逾2 000万t[2]。目前，白酒糟的利用主要集中在生物有机肥[3-4]、食用菌栽培[5-7]、饲料[8-12]、食醋[13]等的研究，尽管取得了一定的研究成果，但仍不足以解决白酒糟的有效利用和环境污染的问题。由于白酒糟水分含量和酸度高，易腐烂变质，且成分复杂，其中含有谷壳等难以降解的物质，严重制约了白酒糟的充分利用。本研究通过筛选适宜发酵白酒糟的枯草芽孢杆菌SD，采用单因素试验和响应面优化试验系统研究枯草芽孢杆菌SD固体发酵白酒糟生产动物微生态制剂的工艺条件，为白酒糟的高值化利用探索新的途径。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　1.1.1 菌种。供试菌种为枯草芽孢杆菌SD（Bacillus subtilis SD），湖南农业大学生物科学技术学院微生物实验室提供。 　　1.1.2 主要试剂。葡萄糖、KH2PO4、MgSO4?7H2O、CaCO3、NaCl（AR，国药集团化学试剂有限公司）；蛋白胨（BR，广州环凯微生物科技有限公司）；MnSO4?H2O（AR，广州化学试剂厂）；牛肉浸膏（BR，国药集团化学试剂有限公司）。酵母粉、麦麸、沸石粉、豆饼粉均由市场采购所得，无虫蛀和霉变。 　　1.1.3 主要仪器设备。恒温培养箱（250B，常州市华普达教学仪器有限公司）；电热恒温鼓风干燥箱（DHG-9070，上海精宏实验设备有限公司）；霉菌培养箱（MJX-