第7章_蛋白质的分离纯化讲解.pptVIP

第7章 蛋白质的分离纯化 蛋白质的分离纯化 透析和超过滤 超速离心 层析（色谱） chromatography 电泳 electrophoresis 1 透析和超过滤 2 超速离心 3 层析（色谱）（Chromatography） 两相：固定相（静相）和流动相（动相） 有效分配系数： 层析 按流动相：气相、液相色谱等； 按操作形式不同：纸层析、薄层层析、柱层析等； 按分离机制：凝胶层析、离子交换层析、亲和层析、吸附层析等。 3.1 纸层析（Filter-paper chromatography） 3.2 薄层层析（Thin-layer chromatography） 根据蛋白质分子大小不同来分离纯化蛋白质的一种方法。 介质：凝胶颗粒（多孔的网状结构） 交联度或孔度（网孔大小）——凝胶的分级分离范围 交联葡聚糖——Sephadex G-50（1500-30000） 琼脂糖 ——Sepharose或Bio-Gel A 聚丙烯酰胺——Bio-Gel P ② 离子交换层析（Ion-exchange chromatography） 根据蛋白质所带电荷的不同进行分离纯化。 介质：离子交换树脂 溶液中的离子与树脂上的带电基团进行交换反应； 各种离子交换能力不同，与树脂结合的牢固程度就不同； 在洗脱过程中，各种离子迁移率不同，达到分离的目的。 氨基酸的