薄层色谱分离偶氮苯解析.pptVIP

薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3cm左右）上均匀的涂一层吸附剂（如硅胶），待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上，凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。展开剂由下往上展开过程中，溶质在固定相（硅胶）和流动相（展开剂）交换分配，溶质也随着展开剂由下向上展开，溶质的极性大小决定了它被固定相（硅胶）吸附的大小。极性越大，被吸附越大，上升就慢，极性越小，随展开剂上升就越快，从而极性不同的化合物得以分开。 偶氮苯具有顺反异构体 三、操作步骤 1、薄板制备与活化 2、点样 先用铅笔在距薄层板一端1cm处轻轻划一横线作为起始线，然后用毛细管吸取样品 偶氮苯 ，在起始线上小心点样（两样点相距1.5ｃｍ），斑点直径一般不超过2mm。 3、展开： 薄层色谱的展开，需要在密闭容器中进行。为使溶剂蒸气迅速达到平衡，可在展开槽内衬一滤纸。常用的展开槽有：长方形盒式和广口瓶式。 本实验选用环己烷—苯（体积比3:1）作展开剂，加入层析缸中，液层高度约0.5cm。当展开剂展开至其前沿距板顶5~10mm处时取出。 4、显色：在碘缸或紫外灯下显色，本实验试样有色，故可直接观察。 5、分别计算反和顺偶氮苯的Rf值。 * 薄层色谱分离偶氮苯 一、实验目的 学习薄层色谱的一般原理和方法 二、实验原理 色谱法是分离、提纯和鉴定有机化合物的重要方法，有着极其广泛的用途。色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该物质时进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。流动的混合物溶液称为流动相；固定的物质称为固定相（可以是固体或液体）。 根据组分在固定相中的作用原理不同，可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱、排阻色谱等；根据操作条件不同，可分为柱色谱、纸色谱、薄层色谱、气相色谱及高效液相色谱等类型。 本次实验主要介绍薄层色谱。 薄层色谱 Thin Layer Chromatography 常用TLC表示，又称薄层层析，属于固－液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。 当展开剂前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出， 干燥后喷以显色剂，或在紫外灯下显色。记下原点 至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值（Rf）： 在相同条件下，特定的化合物具有特定的比移值。 反式内能低于顺式，经光照后转变为顺式异构体 反式极性低于顺式，在薄层中被硅胶吸附小，随展开剂上升快，顺式极性大，被硅胶吸附大，随展开剂上升慢。故展开一段时间后，顺反异构体得以分开。 Rf 顺式 ＜Rf 反式